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嗜吞噬细胞无浆体探针法qPCR试剂盒

价格：￥电议

品牌名称：通蔚生物型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/20 9:24:39

产品摘要：嗜吞噬细胞无浆体探针法qPCR试剂盒是一种由两层膜包裹的小型革兰氏阴性多形性球菌，直径一般约为0.2～2.0 μm，可大至2 μm，寄生在真核宿主的细胞质内。

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详细内容

嗜吞噬细胞无浆体探针法qPCR试剂盒

嗜吞噬细胞无浆体探针法qPCR试剂盒
产品特点

嗜吞噬细胞无浆体（Anaplasma phagocytophilum）是一种由两层膜包裹的小型革兰氏阴性多形性球菌，直径一般约为0.2～2.0 µm，可大至2 µm，寄生在真核宿主的细胞质内。嗜吞噬细胞无浆体属于人兽共患病病原，该病原能引起宿主食欲不振、发热、远端肢体水肿、抑郁、不愿移动和瘀点出血等常见的症状，亦可引起反刍动物产奶量减少。对于健康状况不佳及免疫抑制者，该病原往往导致严重的并发症甚至死亡，对人和动物均有较强致病性，被认为是一种具有重要公共卫生学意义的新兴病原体。因此嗜吞噬细胞无浆体的快速检测具有重要意义，为此本公司以探针法qPCR技术为基础开发了嗜吞噬细胞无浆体的检测试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。

2. 引物和探针经过优化，灵敏度高，检测限可达100拷贝/反应。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，引物是根据嗜吞噬细胞无浆体基因组DNA高度保守区设计，不会跟其它生物的DNA发生交叉反应。

5. 既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少5个数量级。

6. 本产品足够50次20 µL体系的探针法荧光定量PCR反应。

7. 本产品只能用于科研。

参数规格

成分	规格	包装
2×Probe qPCR MasterMix	500µL	0.5mL本色盖
荧光PCR专用模板稀释液	1mL	1.5mL绿盖管
超纯水	1mL	1.5mL绿盖管
嗜吞噬细胞无浆体qPCR引物-探针干粉	50次	0.5mL棕色管
嗜吞噬细胞无浆体阳性对照(1E7拷贝/µL)	50µL	0.5mL黄盖管
使用手册	1份	无
本产品采用五孔盒包装
注意：引物-探针干粉在使用前需要离心，然后在离心管中加入165µL的超纯水充分混匀后再使用，未用完的需要-20℃保存。

使用方法

一、稀释标准曲线样品（以1E1-1E6拷贝/µL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分。本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供DN段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。

2. 用带芯枪头分别加入45 µL荧光PCR专用模板稀释液，用带芯枪头（下同）。

3. 在6号管中加入5 µL 1E7拷贝/µL的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡混匀1分钟，得到1E6拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在5号管中加入5 µL 1E6拷贝/µL的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡混匀1分钟，得到1E5拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在4号管中加入5 µL 1E5拷贝/µL的阳性对照(上步所得)，充分震荡混匀1分钟，得到1E4拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 依次重复上面的操作得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品DNA的制备

7. 如果有N个样品，设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10 µL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。

8. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数样品DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的免提取核酸释放剂。

三、Probe qPCR反应（20µL体系，在样品制备室进行）

9. 如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。下面只以定量分析为例描述操作步骤。

10. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）：

成分	样品管 N+2个	PCR 阴性对照管	标准曲线样品管 (1-6管）
2×Probe qPCR MasterMix	各10µL	10µL	各10µL
嗜吞噬细胞无浆体qPCR引物-探针混合液	各3µL	3µL	各3µL
N+2个待测DNA样本	各7µL	不加	不加
超纯水	不加	7µL	不加
第6步所得标准曲线样品稀释液（1-6号）	不加	不加	各7µL

11.盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR：

过程	温度	时间
预变性	95℃	2min
PCR反应（40个循环）	95℃	15sec
PCR反应（40个循环）	60℃	1min（采集FAM通道，淬灭基团为TAMRA）