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上海通蔚实业有限公司 主营产品:白介素试剂盒, 白介素ELISA试剂盒, 人白介素试剂盒, 大鼠白介素试剂盒, 小鼠白介素试剂盒,ELISA试剂盒

第5年

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肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒

价格:¥ 电议

品牌名称:通蔚生物型号: 原产地:中国大陆 更新时间:2026/10/20 9:24:28

产品摘要:肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒是肠出血性(Enterohemorrhagic)大肠杆菌的一个菌株,但它有部分肠聚集性大肠杆菌(Enteroaggregative)基因。

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产品完善度: 访问次数:546

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公司网站:http://www.tw-reagent.com

详细内容


肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒

产品特点
肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒是肠出血性(Enterohemorrhagic)大肠杆菌的一个菌株,但它有部分肠聚集性大肠杆菌(Enteroaggregative)基因。该菌株导致了2011年O104:H4型大肠杆菌疫情,它分泌的毒素可损伤肠道黏膜,甚至进入血液中破坏红血球,导致溶血性病变,这种症状在肾脏中明显,常导致急性肾衰竭,即为溶血性尿毒综合症,因此对大肠杆菌O104:H4型的快速准确鉴定具有重要意义。为此本公司根据独有的探针法LMAP技术,开发了简单快捷的大肠杆菌O104:H4型LAMP检测试剂盒,它具有下列特点:

1. 即开即用,用户只需要提供DNA样品。

2. 恒温扩增,简单快捷。

3. 含荧光探针,扩增的专一性比染料法和电泳法更强。

4. 检测灵敏性一般比PCR高10倍以上。

5. 一般30分钟内出结果,比PCR快。

6. 引物根据大肠杆菌O104:H4型基因组的保守区设计,不会跟其他生物的DNA发生交叉反应。

7. 上样量大,对20 µL的反应体系,样品加样量高达到14 µL。

8. 内含的dUTP-UNG可防交叉污染。

9. 提供无传染性的阳性对照,便于分析实验结果。

10. 本产品只能用于定性分析,不推荐用于定量分析。

11. 本产品足够50次20 µL体系的探针法LAMP扩增。

12. 只可用于科研。

参数规格

成分

规格

包装

4×LAMP MasterMix (探针法,待加酶)

200µL

0.5mL绿盖管

Bst DNA聚合酶2.0

50µL

0.5mL红盖管

20×大肠杆菌O104:H4型LAMP引物-探针混合液干粉

50次

0.5mL白盖管

大肠杆菌O104:H4型LAMP阳性对照(1×10E4拷贝/µL)

250µL

0.5mL黄盖管

超纯水

1mL

1.5mL蓝盖管

使用手册

1份

无

注 意:使用前请在20×大肠杆菌O104:H4型LAMP引物-探针混合液干粉中加入55µL超纯水,

涡旋震荡半分钟溶解。没用完的需要放-20℃保存。

本产品采用5孔盒包装

使用方法

一、样品DNA的制备

1. 用自选方法纯化样品DNA,本试剂盒跟市场上大多数DNA提取试剂盒兼容,包括本公司的免提取的核酸释放剂。

2. 如果有N个样品,则需要做N+2个样品制备,包括一个样品制备阳性对照(PC)和一个样品制备阴性对照(NC)。PC用10µL本试剂盒提供的阳性对照(1×10E4拷贝/µL)加一定量的水作为样品制备PC,加水后的总体积跟所用核酸纯化试剂盒所要求的起始样本体积一致。NC用水替代。。

肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒
二、LAMP反应(20µL体系)

3. 反应设置:第一次使用时请把所有Bst DNA聚合酶2.0(50µL,本试剂盒提供)加入到 4×LAMP MasterMix(探针法,待加酶)中,轻柔颠倒 20 次充分混匀,然后再取用。如果有N+2个DNA纯化样品,则设置N+4个LAMP扩增,增加LAMP扩增阳性对照和LAMP扩增阴性对照各1个。在N+4个PCR管中加入下列成分:

成分

N+2
个样品管

LAMP
阴性对照

LAMP
阳性对照

4×LAMP MagicMix(探针法,加酶后)

各5µL

5µL

各5µL

20×大肠杆菌O104:H4型LAMP引物-探针混合液

各1µL

1µL

1µL

N+2个样品DNA

各14µL

-

-

超纯水

-

14µL

-

大肠杆菌O104:H4型LAMP阳性对照

(1×10E4拷贝/µL)

-

-

14µL

4.置于荧光定量PCR仪中65℃保温60分钟进行扩增,每分钟在FAM通道采集一次荧光信号。
肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒
三.结果分析

样品制备阳性对照和LAMP阳性对照的反应液将有标准的S扩增曲线,样品制备阴性对照和LAMP阴性对照的反应液将没呈平线,没有S曲线,否则提取实验或扩增实验无效。如果阳性和阴性对照结果正常,则实验有效,可以分析样品的情况。样品管的荧光曲线为S型,则说明样品为阳性,如果为平线则说明待测样品为阴性。典型的荧光检测结果见下图。左边为阳性,右边为阴性。

image.pngimage.png

自备试剂
待测样品

运输及保存
低温运输,-20℃保存,有效期1年

热门标签:肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法qLAMP试剂盒,肠出血性大肠杆菌O104H4血清型探针法试剂盒,探针法qLAMP试剂盒

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