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禽白血病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒

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品牌名称：通蔚生物型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/20 9:24:28

产品摘要：禽白血病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒属于反转录病毒科禽C 型反录病毒群的一种RNA病毒，能够引起禽白血病（Avian Leukosis）。禽白血病是多种肿瘤性疾病的统称，这些疾病主要是淋巴白血病，其次是成红细胞白血病等。患鸡不但产生淋巴样肿瘤，其产蛋量还将下降。

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详细内容

禽白血病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒
产品特点

禽白血病病毒（Avian Leukosis Virus，ALV）属于反转录病毒科禽C 型反录病毒群的一种RNA病毒，能够引起禽白血病（Avian Leukosis）。禽白血病是多种肿瘤性疾病的统称，这些疾病主要是淋巴白血病，其次是成红细胞白血病等。患鸡不但产生淋巴样肿瘤，其产蛋量还将下降。由于该病以垂直传播为主，故难以控制。它还使患鸡抵抗力下降后，容易感染多种其它疾病，给鸡群的饲养管理带来极大困难，所以禽白血病一直被认为是严重危害养禽业的重要的禽病之一。禽白血病病毒还常常污染禽用疫苗、犬用疫苗，甚至人用疫苗，给生物制品工业、医学和生物学研究方面也造成巨大危害。因此快速诊断禽白血病病病毒具有重要的意义。本产品以探针法荧光定量RT-PCR技术为基础开发的专门检测禽白血病病毒的试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品RNA模板。

2. 引物和探针经过优化，分析灵敏性高，可以达到100拷贝/µL。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，引物是根据禽白血病病毒RNA高度保守区设计，不会跟其他的RNA发生交叉反应。

5. 既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。

6. 本产品足够50次20µL体系的探针法qRT-PCR反应。

7. 本产品只能用于科研。

参数规格

成分	规格	包装
探针法RT-PCR缓冲液	0.5mL	0.5mL蓝盖管
探针法RT-PCR酶混合液v2	50µL	0.5mL红盖管
荧光PCR模板专用稀释液	1mL	1.5mL绿盖管
禽白血病病毒qRT-PCR引物-探针干粉	50次	1.5mL棕色管
禽白血病病毒qRT-PCR阳性对照(1×10E7拷贝/µL)	50µL	0.5mL黄盖管
使用手册	1份	无
本产品采用五孔盒包装
注意：引物-探针干粉在使用前需要短暂离心，然后在离心管中加入165µL的超纯水充分混匀后得到引物-探针混合液再使用，未用完的需要-20℃保存。

使用方法

一、稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/µL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DN段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。

2. 用带芯枪头分别加入45µL荧光PCR专用模板稀释液，用带芯枪头，下同。

3. 在6号管中加入5µL1×10E7拷贝/µL的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在5号管中加入5µL1×10E6拷贝/µL的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在4号管中加入5µL1×10E5拷贝/µL的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到6稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

禽白血病病毒探针法荧光定量RT-PCR试剂盒
二、样品RNA的制备

7. 如果有N个样品，设置N+2个提取，多出的一个是样品制备PC（样品制备阳性对照），一个是样品制备NC（样品制备阴性对照）。可以用10µL阳性对照的10000倍稀释液再加上一定量的水使总体积跟每次制备要求的体积一样，以此作为样品制备PC。另外用水作为样品制备NC。

8. 用自选方法纯化样品的RNA，本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。

三、设置qRT-PCR反应（20µL体系，在样品制备室进行）

9. 如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），5个用于标准曲线。如果做定性分析，并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（用试剂盒提供的阳性对照的10000倍稀释液做模板）。下面只以定量分析为例描述操作步骤。

10. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）：

成分	样品管 N+2个	PCR 阴性对照	标准曲线样品管 (1-6管）
探针法qRT-PCR缓冲液	各10µL	10µL	各10µL
探针法qRT-PCR酶混合液	1µL	1µL	各1µL
禽白血病病毒探针法qRT-PCR引物-探针混合液	3µL	3µL	3µL
N+2个待测RNA模板	6µL	不加	不加
超纯水	不加	6µL	不加
第6步所得标准曲线样品稀释液（1-6号）	不加	不加	各6µL

11.盖上盖子后上机，按下面参数进行RT-PCR：

过程	温度	时间
逆转录	50℃	15min
预变性	95℃	5min
PCR反应（40个循环）	95℃	15sec
PCR反应（40个循环）	60℃	60sec（采集FAM通道的荧光信号，淬灭基团为BHQ1)