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hblC蜡样芽孢杆菌hblC基因探针法qPCR试剂盒

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品牌名称：通蔚生物型号：原产地：中国大陆更新时间：2026/10/20 9:24:28

产品摘要：hblC蜡样芽孢杆菌hblC基因探针法qPCR试剂盒又称仙人掌杆菌，是一种革兰氏阳性菌，β溶血性的杆状细菌。蜡样芽孢杆菌是引起食物中毒的常见细菌，临床表现有两种类型：呕吐型和腹泻型。

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详细内容

hblC蜡样芽孢杆菌hblC基因探针法qPCR试剂盒
产品特点

蜡样芽孢杆菌（Bacillus cereus），又称仙人掌杆菌，是一种革兰氏阳性菌，β溶血性的杆状细菌。蜡样芽孢杆菌是引起食物中毒的常见细菌，临床表现有两种类型：呕吐型和腹泻型。腹泻型毒素至少由5类毒力因子构成:溶血性肠毒素HBL(hbl，包括A、B、C、D几种)、非溶血性肠毒素Nhe(nhe)、细胞毒素K(cytK)、肠毒素T(bceT)以及肠毒素FM(entFM)。因此快速检测蜡样芽孢杆菌hblC基因具有重要意义。本产品就是以探针法qPCR技术为基础开发的专门检测蜡样芽孢杆菌hblC基因的试剂盒，它具有下列特点：

1. 即开即用，用户只需要提供样品DNA模板。

2. 引物和探针经过优化，分析灵敏性高，可以达到100拷贝/µL。

3. 提供阳性对照，便于区分假阴性样品。

4. 特异性高，引物是根据蜡样芽孢杆菌hblC基因DNA高度保守区设计，不会跟其他生物的DNA发生交叉反应。

5. In silico分析发现本产品可以检测到已知的所有9种致病性蜡样芽孢杆菌hblC基因：L. interrogans、L. kirschneri、L. noguchii、L. borgpetersenii、L. weilii、L. santarosai、L. alexanderi、L. alstonii和L. kmetyi。

6. 既可用于定性检测，又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。

7. 本产品足够50次20µL体系的探针法荧光定量PCR反应。

8. 本产品只能用于科研。

参数规格

成分	规格	包装
2×Probe qPCR MasterMix	0.5mL	0.5mL本色盖
荧光PCR专用模板稀释液	1mL	1.5mL绿盖管
超纯水	1mL	1.5mL蓝盖管
蜡样芽孢杆菌hblC基因qPCR引物-探针混合液	150µL	0.5mL棕色管
蜡样芽孢杆菌hblC基因qPCR阳性对照(1×10E7拷贝/µL)	50µL	0.5mL黄盖管
使用手册	1份	无
本产品采用五孔盒包装
注意：引物-探针干粉在使用前需要离心，然后在离心管中加入165µL的超纯水充分混匀后再使用，未用完的需要-20℃保存。

使用方法

一、稀释标准曲线样品（以10E1-10E6拷贝/µL这6个10倍稀释度为例）。
由于标准品浓度非常高，因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行，千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分）。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体样品做阳性对照，只提供无传染性的DN段作为阳性对照。

1. 标记6个离心管，分别为6，5，4，3，2，1。

2. 用带芯枪头分别加入45 µL荧光PCR专用模板稀释液，用带芯枪头，下同。

3. 在6号管中加入5 µL 1×10E7拷贝/µL 的阳性对照(试剂盒提供)，充分震荡1分钟，得1×10E6拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

4. 换枪头，在5号管中加入5 µL 1×10E6拷贝/µL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E5拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

5. 换枪头，在4号管中加入5 µL 1×10E5拷贝/µL 的阳性对照(上步稀释所得)，充分震荡1分钟，得1×10E4拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。

6. 重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。

二、样品DNA的制备

7. 如果有N个样品，设置N+2个提取，多出的一个是PC（样品制备阳性对照），一个是NC（样品制备阴性对照）。可以用10µL上步所得4号稀释液再加上一定量的水使总体积跟核酸制备试剂盒所要求的起始样本体积一样，以此作为PC。另外用水作为NC。

8. 用自选方法纯化样品的DNA，本试剂盒跟市场上大多数样品DNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的免提取核酸释放剂。

hblC蜡样芽孢杆菌hblC基因探针法qPCR试剂盒
三、Probe qPCR反应（20µL体系，在样品制备室进行）

9. 如果做定量分析并且只做1次重复，则标记N+9个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复，则标记N+4个PCR管，其中N+2个用于上步得到的N+2个样品，1个用于PCR阴性对照（用水做模板），1个用于PCR阳性对照（直接用第6步第4号管的阳性对照稀释液做模板）。下面只以定量分析为例描述操作步骤。

10. 在标记管中按下表加入各成分（本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照，并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加）：

成分	样品管 N+2个	PCR 阴性对照	标准曲线样品管 (1-6管）
2×Probe qPCR MasterMix	各10µL	10µL	各10µL
蜡样芽孢杆菌hblC基因qPCR引物-探针混合液	各3µL	3µL	各3µL
N+2个待测DNA样本	各7µL	不加	不加
超纯水	不加	7µL	不加
第6步所得标准曲线样品稀释液（1-6号）	不加	不加	各7µL

11.盖上盖子后上机，按下面参数进行PCR：

过程	温度	时间
预变性	95℃	2min
PCR反应（45个循环）	95℃	15sec
PCR反应（45个循环）	58℃	30sec（采集FAM通道的荧光信号，设置BHQ-1为淬灭基团）