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大鼠胚胎成纤维细胞(丝裂霉素C处理)
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详细内容
细胞名称 : 大鼠胚胎成纤维细胞(丝裂霉素C处理)
细胞品牌 : 通蔚生物
种属来源 : 大鼠
组织来源 : 胚胎
生长特性 : 贴壁生长
细胞形态 : 成纤维细胞样
产品简介
大鼠胚胎成纤维细胞采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。
成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的胚胎成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。
30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁完全,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5⁻⁷天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。
该细胞常用作ES细胞培养常用的饲养层细胞,能产生抑制ES细胞自主分化和促进ES细胞增殖的因子,故能有效地促进ES细胞的增殖并维持其未分化特性和多潜能性,且分泌效果优于外源添加的一些因子,而且可以为ES细胞的培养提供类似于体内的微环境,故在研究哺乳动物ES细胞中得到广泛使用。
质量检测 : 经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,支原体、细菌、酵母和真菌检测为阴性
细胞规格 : T25或1mL冻存管
培 养 基 : 大鼠原代胚胎成纤维细胞专用培养基
培养条件 : 气相:95%空气+5%二氧化碳;温度:37℃
换液频率 : 每2-3天换液一次
消 化 液 : 0.25%胰蛋白酶
细胞货期 : 6周左右
发货方式 : 复苏发货(免运输费用)/ 冻存发货(需加干冰运输费用)
供应范围 : 仅限于科研实验使用,绝不可作为动物或人类疾病的治疗产品使用
特别说明 : 具体操作步骤以随货产品说明书为主

细胞培养操作
收货处理 : 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2,饱和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态
传代密度 : 细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养
传代代数 : 可传5代左右;3代以内状态为佳
传代比例 : 首次传代建议1:2传代,1:2传代就是1个T25瓶传2个T25瓶或者2个6cm皿。不是1个T25瓶传2个10cm皿
传代方法
1. 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2. 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至T25培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后,再加入5ml完全培养基终止消化;
3. 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2比例接种T25培养瓶传代,然后补充新鲜的完全培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4. 待细胞完全贴壁后,培养观察;之后每2-3天换液一次新鲜的完全培养基。
重要提醒
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 运输用的培养基(灌液培养基)不能再用来培养细胞,请换用按照说明书细胞培养条件新配制的完全培养基来培养细胞。
到货须知
1. 收到细胞后,首先观察并拍照记录细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,干冰运输的细胞检查干冰是否完全挥发,细胞是否解冻,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 静置完成后,取出细胞培养瓶,镜检、拍照(当天以及第 2,3 天请拍照),记录细胞状态 (所拍照片将作为后续服务依据);建议细胞传代培养后,定期拍照、记录细胞生长状态。
3. 由于运输的原因,部分细胞由于温度变化及剧烈碰撞死亡破碎形成碎片,是正常现象。个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时和我们联系,告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪回访直至问题解决。
4. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等,确保细胞培养条件一致,若由于培养条件不一致而导致细胞出现问题,责任由客户自行承担。
细胞予重发
1. 细胞运输中遭遇的各种问题,细胞丢失瓶身破损、培养液严重漏液等,重发。
2. 收到细胞未开封,如出现污染状况,重发。
3. 收到细胞3天内,发现污染问题,经核实后,重发。
4. 常温发货细胞静置2小时后,干冰冻存发货细胞复苏2天后,绝大多数细胞未存活,经核实后,重发。
5. 常温发货的细胞静置22小时且未开封或干冰冻存发货的细胞复苏2天后,出现污染经核实后,重发。
6. 细胞活性问题在收到产品3天内提出真实实验结果,用台盼蓝染色法鉴定细胞活力,经核实后,重发。
细胞不予重发
1. 客户操作造成细胞污染,不重发。
2. 客户严重操作失误致细胞状态不好,不重发。
3. 非我们推荐细胞培养体系致的细胞状态不好,不重发。
4. 细胞状态不好,未提供真实清晰的培养前3天的细胞状态照片,不重发。
5. 细胞培养时经其它处理导致细胞出现问题的,不重发。
6. 收到细胞发现问题与客服人员沟通的时间证明大于3天的,不重发。
热门标签:大鼠胚胎成纤维细胞(丝裂霉素C处理),胚胎成纤维细胞(丝裂霉素C处理),大鼠细胞(丝裂霉素C处理)













