产品说明：

汇智泰康公司的副溶血弧菌LAMP检测试剂盒，采用环介导等温扩增结合钙黄绿素显色技术，适用于食品及环境中副溶血弧菌的快速检测。

本产品具有以下特点：

• 简单快速，只需在反应管中加入待测DNA模版，60-65℃恒温反应60min即可肉眼观察结果，不需要特殊仪器。

• 可用于检测食品样本前增菌液或细菌纯培养物（如：菌落）。

• 不含有任何有毒的试剂。

产品组成（24次/包装）

运输及保存条件

干冰运输。-20^oC条件下保存6个月。避免反复冻融。

使用说明

• 模板制备

• 食品样本前增菌液：吸取标准方法培养的食品样本前增菌液200 μL加入1.5 mL离心管中，10 000 r/min离心2 min，弃上清。加入100 μL DNA提取液A，98^oC水浴加热10 min，加入20 μLDNA提取液B，混匀后离心，上清液即为DNA模板。制备的DNA样品-20^oC可保存。

• 纯细菌培养物：对于标准方法分离到的疑似菌落，可直接挑取疑似菌落，按a中步骤，加入DNA提取液A和B制备DNA模板

• LAMP检测

• 取出n个LAMP反应管（n=待测样本数+阳性对照+阴性对照）于冰上融化并短暂离心；

• 向上述反应管加入阴性对照、待测样品或阳性对照DNA样本各2 μL。

注意：加样时枪头要穿过保护层加至反应液层，盖紧管盖并做好标记。由于LAMP反应非常灵敏，建议使用带滤芯的枪头，并在生物安全柜中操作，避免可能出现的污染。

• 64^oC恒温反应60 min。

• 80^oC加热10 min终止反应。

结果判断

• 肉眼或紫外灯下观察：阴性对照管，橙色澄清；阳性对照，绿色浑浊。

• 若待测样品管中液体呈橙色澄清，则可初步判断待测样品中不含副溶血弧菌；若待测样品管中液体呈绿色浑浊，则可初步判断待测样品中含副溶血弧菌；

图注 1：阴性对照

2：阳性对照

注意事项

• 实验开始前对工作台进行紫外照射，并使用1%次氯酸钠或75%酒精清理工作台面。需定期按上述要求对各实验区域进行清理。

• 实验室严格分区，各区物品，严禁交叉使用。

a. 待测样品模板制备区

b. 反应体系配制区

c. 反应区及结果观察区（建议在通风橱中进行）

• 结果观察时应该小心谨慎，避免剧烈震荡，反应物外溢。

• 结果分析完成后反应管应密封于容器内，丢弃于地点；实验过程中的废弃物及一次性耗材均需灭菌后方能丢弃。