产品介绍

AF532 ECL是将从刺桐（Erythrina Cristagalli）种子中天然提取纯化的刺桐凝集素，与Alexa Fluor 532荧光染料通过成熟的马来酰亚胺定向偶联工艺制备而成的糖链特异性532nm激光专属标记科研试剂。它完整保留了刺桐凝集素对半乳糖与N-乙酰半乳糖胺类糖链残基的高亲和力识别特性，依托Alexa Fluor 532染料优化的花菁类荧光骨架，实现了与532nm激光线的近乎完美的光谱匹配，全程严格控制定向偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料，解决了传统橙红通道凝集素在532nm激光下激发效率低、信号亮度不足的痛点。试剂为橙红色至紫红色冻干品，在中性生理缓冲液中溶解分散性，是532nm激光专属通道开展糖基化研究的标杆级高亮度工具。

基础参数

中文名称：AF532标记刺桐凝集素，AF532-刺桐凝集素

英文名称：AF 532 ECL，Alexa Fluor532-ECL，AF532-Erythrina Cristagalli Lectin

外观状态：橙红色至紫红色冻干品

荧光光谱参数：最大激发波长约532 nm，发射波长约554 nm，与532nm固体激光线实现近乎完美的光谱匹配

储存条件：-20℃避光密封干燥长期保存，避免反复冻融，复溶后建议分装为单次使用量，2–8℃避光短期可稳定存放，操作全程避免接触强氧化试剂，防止荧光基团发生不可逆猝灭

用途：半乳糖类糖链532nm激光通道高亮度标记，激光共聚焦成像，532nm配置流式细胞仪专属检测

作用机理

AF532 ECL中的刺桐凝集素以天然活性二聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，通过配位键与氢键网络特异性识别并结合样本中半乳糖与N-乙酰半乳糖胺类糖链残基，对该类特征糖基化修饰具有高选择性。AF532荧光基团通过定向硫醚键锚定在ECL蛋白表面远离糖结合口袋的巯基位点上，偶联过程完全不影响凝集素的天然构象与糖链识别活性。在532nm波长激光激发下，偶联在蛋白上的AF532基团可发射出明亮的554nm橙黄荧光，由于其激发峰与532nm激光线几乎完全重合，激发效率远高于传统TRITC等染料，可在同等激光功率下获得数倍更高的荧光信号。

核心产品优势

AF532 ECL的核心差异化优势集中在532nm激光专属的超高激发效率综合表现上，相比传统橙红通道标记的同类凝集素，AF532染料的激发峰与532nm固体激光线匹配，在共聚焦显微镜与配置532nm激光的流式细胞仪上，无需高功率激光即可获得极高亮度的荧光信号，大幅降低长时间成像对活细胞的光毒性损伤。试剂经过严格的游离染料去除工艺，游离染料残留低于2%，非特异性吸附极低，同时其光稳定性，在532nm激光连续扫描下信号衰减远低于同波段传统染料，是532nm激光专属通道开展糖基化研究的标杆级高亮度工具。

应用领域

AF532 ECL可用于共聚焦高分辨成像，依托其532nm激光下的超高亮度特性，在共聚焦显微镜上对细胞样本进行高分辨率成像，清晰分辨细胞膜表面微区结构上的靶标糖链分布细节，获得高信噪比的精细图像。该试剂可应用于532nm配置流式细胞仪检测，作为专属通道探针在流式细胞仪上完成靶标糖链的高灵敏度检测，低丰度表达的亚群也能获得清晰的信号分群效果。同时它也适用于凝胶荧光扫描检测，作为标记探针在凝集素印迹实验中标记转印到膜上的靶标糖蛋白，配合532nm激光凝胶扫描仪获得高对比度的清晰条带，为糖生物学相关非医疗方向研究提供高亮度的专属通道工具。

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