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AF 660 NPL,AF660-水仙凝集素,不会出现不同通道间的信号溢出问题
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详细内容
产品介绍
AF660-NPL是将从水仙鳞茎中天然提取的Narcissus Pseudonarcissus凝集素(NPL),与Alexa Fluor660近红外荧光染料通过稳定的共价偶联技术制备而成的糖链特异性近红外荧光标记科研试剂。它完整保留了水仙凝集素对高甘露糖型寡糖链、末端α-D-甘露糖残基的高亲和力识别特性,同时引入AF660染料在660nm波长下的高组织穿透性与极低自发荧光干扰特性,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离AF660染料,解决了传统短波长荧光凝集素难以实现大厚度组织深层糖链成像的痛点。试剂以稳定的蓝紫色至黑紫色冻干粉末形式提供,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是糖生物学大厚度组织三维成像研究中660nm近红外通道下高甘露糖糖链示踪的高可靠性特色工具。
基础参数
中文名称:Alexa Fluor660标记水仙凝集素,AF660-水仙凝集素
英文名称:AF 660 NPL,AF660-NPL,Alexa Fluor660-NPL,Alexa Fluor660-Narcissus Pseudonarcissus Lectin
外观状态:蓝紫色至黑紫色冻干粉末
荧光光谱参数:激发波长约660 nm,发射波长约672 nm
储存条件:-20℃以下避光密封干燥保存,避免反复冻融,复溶后4℃环境下需3天内使用完毕,操作过程中全程严格避光,防止AF660荧光染料发生光漂白降解
用途:高甘露糖糖链近红外荧光标记,大厚度组织深层糖链成像,多色实验远红通道独立糖示踪
作用机理
AF660-NPL中的水仙凝集素蛋白以天然活性二聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中含末端α-1,3或α-1,6连接甘露糖残基的高甘露糖型寡糖链,对高甘露糖结构的亲和力远高于普通单甘露糖分子。共价偶联在蛋白表面赖氨酸残基上的AF660荧光基团,在660nm波长光激发下可发射出明亮的672nm近红外荧光,该波段处于生物组织的光学透明窗口区域,不仅几乎完全规避了生物样本内源性物质的自发荧光干扰,还能大幅降低组织对激发光和发射光的散射吸收,直接将凝集素的糖链识别信号转化为可穿透数百微米厚度组织的低背景近红外荧光信号,无需二次孵育等复杂操作,一步孵育即可完成靶标高甘露糖糖链的原位标记,整个过程不会破坏凝集素的天然糖结合活性,也不会对样本的基础细胞结构造成明显影响。
应用领域
AF660-NPL可用于高甘露糖糖链近红外荧光标记,对固定细胞或薄组织切片进行一步孵育标记,清晰呈现样本中高甘露糖型糖蛋白的精细分布模式,低丰度靶标糖链也能获得高灵敏度检测。该试剂可应用于大厚度组织深层糖链成像,依托近红外波段的高穿透特性,在数百微米厚度的透明化组织样本中,获得深层区域高甘露糖糖链的清晰成像结果。同时它也适用于多色实验远红通道独立糖示踪,与AF405、AF488、AF594等不同波段的荧光探针搭配使用,轻松实现四色及以上的多通道共定位分析,直观展示高甘露糖糖链与多个靶标蛋白的空间分布关系,为大厚度组织样本的多维度糖生物学研究提供稳定可靠的特色工具。
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热门标签:AF,660,NPL













