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AF700-水仙凝集素,AF 700 NPL,可应用于大组织样本毫米级深层成像
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详细内容
产品介绍
AF700-NPL是将从水仙鳞茎中天然提取的Narcissus Pseudonarcissus凝集素(NPL),与Alexa Fluor700远红光近红外交界区荧光染料通过稳定的共价偶联技术制备而成的糖链特异性远红光荧光标记科研试剂。它完整保留了水仙凝集素对高甘露糖型寡糖链、末端α-D-甘露糖残基的高亲和力识别特性,同时引入AF700染料在700nm波长下的高组织穿透性与极低样本光散射特性,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离AF700染料,解决了中短波长荧光凝集素在毫米级大组织样本中成像深度不足的痛点。试剂以稳定的紫红色至近黑色冻干粉末形式提供,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是糖生物学大组织样本深层糖链示踪场景下700nm通道的高可靠性特色工具。
基础参数
中文名称:Alexa Fluor700标记水仙凝集素,AF700-水仙凝集素
英文名称:AF 700 NPL,AF700-NPL,Alexa Fluor700-NPL,Alexa Fluor700-Narcissus Pseudonarcissus Lectin
荧光标记度:每个NPL蛋白分子偶联2-3个AF700荧光基团
外观状态:紫红色至近黑色冻干粉末
储存条件:-20℃以下避光密封干燥保存,避免反复冻融,复溶后4℃环境下需2天内使用完毕,操作过程中全程严格避光,防止AF700荧光染料发生光漂白降解
用途:高甘露糖糖链远红光荧光标记,大组织样本毫米级深层成像,多色实验远红近红外交界通道独立糖示踪
作用机理
AF700-NPL中的水仙凝集素蛋白以天然活性二聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可特异性识别并结合样本中含末端α-1,3或α-1,6连接甘露糖残基的高甘露糖型寡糖链,对高甘露糖结构的亲和力远高于普通单甘露糖分子。共价偶联在蛋白表面赖氨酸残基上的AF700荧光基团,在700nm波长光激发下可发射出明亮的723nm远红外荧光,该波段处于生物组织光学透明窗口的核心区域,几乎完全规避了所有生物内源性物质的自发荧光干扰,同时大幅降低组织对激发光和发射光的散射与吸收效应,直接将凝集素的糖链识别信号转化为可穿透毫米级厚度组织的低背景远红外荧光信号,无需二次孵育等复杂操作,一步孵育即可完成靶标高甘露糖糖链的原位标记,整个过程不会破坏凝集素的天然糖结合活性,也不会对样本的基础细胞结构造成明显影响。
核心定位产品优势
AF700-NPL的核心差异化优势集中在700nm通道的超高组织穿透性能上,相比680nm及更短波长标记的NPL产品,它的荧光波长进一步向近红外区域延伸,组织光散射效应降到极低,在透明化大组织样本中的有效成像深度可达1-2毫米,同时样本自发荧光完全消失,成像信噪比相比AF680-NPL仍有进一步提升。试剂经过严格的游离染料去除工艺,非特异性吸附极低,相同工作浓度下背景信号远低于普通市售AF700标记凝集素产品,同时AF700染料的光稳定性,长时间连续激光照射下荧光信号衰减极慢,完全适配光片显微镜的大样本快速三维成像需求,是700nm远红近红外交界通道下开展大组织样本深层高甘露糖糖基化研究的稀缺性特色工具。
应用领域
AF700-NPL可用于高甘露糖糖链远红光荧光标记,对固定细胞或各类薄组织切片进行一步孵育标记,清晰呈现样本中高甘露糖型糖蛋白的精细分布模式,极低丰度靶标糖链也能获得高灵敏度检测。该试剂可应用于大组织样本毫米级深层成像,依托远红外波段的超高穿透特性,在厘米级透明化组织样本中,获得毫米级深层区域高甘露糖糖链的清晰成像结果。同时它也适用于多色实验远红近红外交界通道独立糖示踪,与AF405、AF488、AF594、AF647等不同波段的荧光探针搭配使用,轻松实现五色及以上的多通道共定位分析,直观展示高甘露糖糖链与多个靶标蛋白的空间分布关系,为大组织样本的多维度糖生物学研究提供稳定可靠的特色工具。

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