产品介绍

AF555-NPL是将从水仙鳞茎中天然提取的Narcissus Pseudonarcissus凝集素（NPL），与Alexa Fluor555橙红色荧光染料通过稳定的共价偶联技术制备而成的糖链特异性高亮度橙红色荧光标记科研试剂。它完整保留了水仙凝集素对高甘露糖型寡糖链、末端α-D-甘露糖残基的高亲和力识别特性，同时引入AF555染料行业标杆级的荧光亮度与光稳定性，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离AF555染料，解决了传统Cy3类标记凝集素光稳定性不足、长时间成像易淬灭的痛点。试剂以稳定的橙红色至红色冻干粉末形式提供，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是糖生物学研究中经典橙红色通道下高甘露糖糖链示踪的高可靠性标杆工具。

基础参数

中文名称：AF555-水仙凝集素，Alexa Fluor555标记水仙凝集素

英文名称：AF 555 NPL，AF555-NPL，Alexa Fluor555-NPL，Alexa Fluor555-Narcissus Pseudonarcissus Lectin

外观状态：橙红色至红色冻干粉末

荧光光谱参数：激发波长约555 nm，发射波长约565 nm

储存条件：-20℃以下避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后4℃环境下可短期放置2周，操作过程中全程严格避光，防止AF555荧光染料发生光漂白降解

用途：高甘露糖糖链高亮度橙红色荧光标记，多色荧光成像橙红色通道糖示踪，流式细胞术PE通道兼容糖表型分析

作用机理

AF555-NPL中的水仙凝集素蛋白以天然活性二聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中含末端α-1,3或α-1,6连接甘露糖残基的高甘露糖型寡糖链，对高甘露糖结构的亲和力远高于普通单甘露糖分子。共价偶联在蛋白表面赖氨酸残基上的AF555荧光基团，在常规555nm波长光激发下可发射出明亮的565nm橙红色荧光，该波段与几乎所有常规荧光显微镜、共聚焦显微镜、流式细胞仪的561nm激光通道完全适配，直接将凝集素的糖链识别信号转化为高亮度的橙红色荧光信号，无需二次孵育等复杂操作，一步孵育即可完成靶标高甘露糖糖链的原位标记，整个过程不会破坏凝集素的天然糖结合活性，也不会对样本的基础细胞结构造成明显影响。

核心定位产品优势

AF555-NPL的核心差异化优势集中在经典橙红色通道的标杆级综合性能上，相比传统Cy3标记的NPL产品，AF555染料的荧光量子产率更高、光稳定性提升数倍，长时间激光照射下荧光信号衰减极慢，完全适配共聚焦长时间层扫、大视场样本拼接成像等对光稳定性要求高的实验场景，成像信噪比相比Cy3-NPL提升2倍以上。试剂经过严格的游离染料去除工艺，非特异性吸附极低，相同工作浓度下背景信号远低于普通市售AF555标记凝集素产品，同时通过控制标记度，既保证了足够的橙红色荧光亮度，又避免了过高标记度导致的凝集素糖结合活性下降问题，是橙红色通道下开展高甘露糖糖基化研究的经过大量文献广泛验证的标杆级成熟工具。

应用领域

AF555-NPL可用于高甘露糖糖链高亮度橙红色荧光标记，对固定细胞或组织切片进行一步孵育标记，清晰呈现样本中高甘露糖型糖蛋白的精细分布模式，低丰度靶标糖链也能获得高灵敏度检测。该试剂可应用于多色荧光成像橙红色通道糖示踪，与AF405、AF488、AF647等不同波段的荧光探针搭配使用，通道间光谱间隔充足几乎无串扰，轻松实现四色及以上的多通道共定位分析。同时它也适用于流式细胞术PE通道兼容糖表型分析，依托常规流式细胞仪的561nm检测通道，即可实现大量细胞样本的高甘露糖糖基化状态高通量定量检测，为糖生物学基础研究提供稳定可靠的标杆级核心工具。

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