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AF 647 NPL,AF647-水仙凝集素,适用于多色实验远红通道独立糖示踪
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详细内容
英文名称:AF 647 NPL,Alexa Fluor647-NPL,Alexa Fluor647-Narcissus Pseudonarcissus (Daffodil) Lectin
中文名称:Alexa Fluor 647标记水仙凝集素,AF647黄水仙凝集素
产品纯度:≥95%
储存条件:-20℃以下冰冻、干燥、避光密封保存,建议小体积分装后冻存,严格避免反复冻融,取用前置于4℃环境缓慢平衡温度后再开盖,全程避光操作防止AF647远红荧光基团发生光敏降解,同时避免接触强酸环境,防止凝集素蛋白构象改变失活
用途:依托AF647低背景远红荧光信号与NPL对高甘露糖糖链的特异性识别能力,靶向定位靶标糖链,用于高背景生物样本与多色共标体系中的糖链标记相关糖生物学科研实验
产品介绍
AF 647 NPL是糖生物学研究领域高背景样本成像场景下的标杆级远红通道凝集素探针,由天然黄水仙球茎中提取纯化的NPL凝集素蛋白与Alexa Fluor 647荧光染料通过稳定酰胺键共价偶联制备而成,完整保留NPL天然糖结合特异性的同时,赋予分子极低背景的远红荧光成像性能。NPL天然蛋白对高甘露糖型糖链具有极高的识别特异性,可结合多分支高甘露糖序列,对其他常见单糖的非特异性结合极低,是复杂生物样本中高甘露糖修饰示踪的核心识别工具;偶联使用的Alexa Fluor 647染料最大激发波长为647nm,最大发射波长为665nm,处于经典远红荧光区间,完全适配绝大多数共聚焦显微镜与流式细胞仪上广泛配置的633nm/640nm激光器,磺化修饰的染料结构让其在水相环境中依然保持极高的荧光量子产率。产品经过多步凝胶过滤层析深度纯化,完全去除游离未结合的AF647荧光小分子,荧光染料与蛋白的摩尔比(F/P)严格控制在2-3之间,在保证远红荧光信号强度的同时避免高取代度带来的蛋白疏水团聚与非特异性吸附,批次间蛋白活性与荧光标记效率一致性极高。
性能与应用
经SDS-PAGE、紫外荧光光谱、糖结合活性三重质控,产品纯度稳定在95%以上,在中性pH 7.2⁻⁷.4的PBS缓冲液中可完全溶解形成透明均一的蛋白溶液。核心优势为本底荧光干扰极低,远红波段完全避开了生物样本中细胞自发荧光、组织色素自发荧光的集中分布区间,在石蜡切片、全血样本等高背景体系中依然能获得极低的非特异性信号,信噪比表现远超短波长荧光标记的凝集素探针;光谱串扰几乎为零,荧光光谱与蓝、绿、橙红通道的常规荧光探针几乎无任何重叠,在四通道及以上的多色荧光共定位实验中可作为独立远红通道信号,完全不会出现不同通道间的信号溢出问题;光稳定性,远红花菁母核的抗光解性能经过优化,长时间激光照射下荧光信号保留率远高于传统Cy5标记的凝集素探针。可直接用于高背景组织切片中高甘露糖糖链的原位定位分析、流式细胞术多色面板中细胞高甘露糖修饰水平的同步检测、凝集素芯片上高甘露糖糖链的高灵敏度荧光扫描等相关糖生物学科研实验。操作时建议使用640nm激光作为激发光源,搭配670/50带通滤光片采集信号,可获得的成像信噪比。

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热门标签:AF,647,NPL,AF647-水仙凝集素













