产品介绍

AF405-NPL是将从水仙鳞茎中天然提取的Narcissus Pseudonarcissus凝集素（NPL），与Alexa Fluor405蓝色荧光染料通过共价偶联技术制备而成的糖链特异性蓝紫色荧光标记科研试剂。它完整保留了水仙凝集素对高甘露糖型寡糖链、末端α-D-甘露糖残基的高亲和力识别特性，同时引入AF405染料适配405nm固态激光器的光学性能，全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比，通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离AF405染料，解决了传统短波长荧光凝集素光谱适配性差、普通荧光设备难以高效激发的痛点。试剂以稳定的蓝紫色至深紫色冻干粉末形式提供，在中性生理缓冲液中溶解分散性良好，是流式细胞术与共聚焦成像体系中405nm通道下高甘露糖糖链示踪的高可靠性标杆工具。

基础参数

中文名称：Alexa Fluor405标记水仙凝集素，AF405-水仙凝集素

英文名称：AF 405 NPL，AF405-NPL，Alexa Fluor405-NPL，Alexa Fluor405-Narcissus Pseudonarcissus Lectin

外观状态：蓝紫色至深紫色冻干粉末

荧光光谱参数：激发波长约401 nm，发射波长约421 nm

储存条件：-20℃以下避光密封干燥保存，避免反复冻融，复溶后4℃环境下可短期放置2周，操作过程中全程严格避光，防止AF405荧光染料发生光漂白降解

用途：高甘露糖糖链蓝紫色荧光标记，流式细胞术405nm通道糖表型分析，共聚焦多色成像低串扰糖示踪

作用机理

AF405-NPL中的水仙凝集素蛋白以天然活性二聚体形式存在，每个亚基都保留完整的糖结合口袋，可特异性识别并结合样本中含末端α-1,3或α-1,6连接甘露糖残基的高甘露糖型寡糖链，对高甘露糖结构的亲和力远高于普通单甘露糖分子。共价偶联在蛋白表面赖氨酸残基上的AF405荧光基团，可被常规生物实验室标配的405nm固态激光器高效激发，发射出明亮的421nm窄带蓝紫色荧光，该波段与常规DAPI、Pacific Blue等405通道探针的光谱特性适配，同时与FITC、PE等长波荧光通道的光谱间隔充足，几乎无串扰，直接将凝集素的糖链识别信号转化为独立的蓝紫色荧光信号，无需二次孵育等复杂操作，一步孵育即可完成靶标高甘露糖糖链的原位标记，整个过程不会破坏凝集素的天然糖结合活性，也不会对样本的基础细胞结构造成明显影响。

应用领域

AF405-NPL可用于高甘露糖糖链蓝紫色荧光标记，对固定细胞或组织切片进行一步孵育标记，清晰呈现样本中高甘露糖型糖蛋白的空间分布模式，信号亮度高、背景低。该试剂可应用于流式细胞术405nm通道糖表型分析，直接在流式样本体系中完成细胞表面高甘露糖糖链的荧光标记，依托常规流式细胞仪的405nm检测通道，即可实现不同细胞亚群表面高甘露糖糖基化状态的高通量定量检测。同时它也适用于共聚焦多色成像低串扰糖示踪，与FITC、Cy3、Cy5等不同波段的荧光探针搭配使用，在多色共聚焦成像面板中占据独立的405nm通道，实现不同靶标蛋白与高甘露糖糖链的同步无串扰共定位分析，为高参数多色联合糖生物学研究提供稳定可靠的核心工具。

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