一、基础理化参数

Cy3‑NHS

中文名称：Cy3 琥珀酰亚胺酯

英文名称：Cy3‑NHS，Cyanine3‑NHS，Cy3‑NHS，Cyanine3‑NHS ester

CAS号 :1032678-38-8

分子式：C₃₄H₄₀ClN₃O₄

分子量：590.15

ex/em :554/566 nm

纯度：≥95%

外观：亮红色固体粉末

溶解性：溶于 DMSO、DMF，水相标记需要少量有机溶剂助溶

反应基团：N‑羟基琥珀酰亚胺酯，靶向伯氨基

Cy3‑TFP ester

中文名称：Cy3‑四氟苯基酯

英文名称：Cy3‑TFP ester，Cyanine3‑TFP ester

分子式：C₃₈H₃₇F₄N₂O₄

分子量：658.71

纯度：≥95%

外观：红色粉末

溶解性：易溶于无水有机溶剂，在含水缓冲液稳定性优于 NHS 酯

反应基团：四氟苯基活化酯，氨基特异性标记

Cy3‑Azide

中文名称：Cy3‑叠氮，Cy3‑叠氮化物

英文名称：Cy3‑Azide，Cy3‑N3，Cyanine3‑Azide，Cyanine3‑N3

分子式：C33H43ClN6O

分子量：575.19

ex/em :554/566 nm

纯度：≥95%

外观：橙红色固体粉末

溶解性：溶于 DMSO、DMF；磺化版本水溶性

反应基团：叠氮基团‑N₃，点击化学专用

二、产品概述

Cy3是科研领域经典的橙红色花菁（Cyanine）荧光染料，消光系数高、荧光亮度出众，光谱适配实验室532 nm、555 nm激光器以及传统TRITC滤光片通道，pH4‑10区间荧光信号稳定，不受酸碱度变化干扰，是多色荧光成像中红色通道的常用选择。Cy3‑NHS、Cy3‑TFP ester、Cy3‑Azide拥有完全一致的发色团，光学性能无差别，但是末端活性官能团完全不同，分别覆盖常规氨基标记、水相氨基偶联、生物正交点击化学三大方向，满足从基础蛋白标记到活细胞代谢示踪的多样化科研需求。

Cy3‑NHS是氨基标记最经典的活化酯染料，应用范围广、实验方案成熟，适合抗体、重组蛋白批量偶联；Cy3‑TFP ester属于改良型氨基活化染料，解决了传统NHS酯遇水快速水解失效的痛点，在含水环境中稳定性大幅提升；Cy3‑Azide为点击化学探针，依靠叠氮‑炔基特异性反应实现生物正交标记，不会与生物大分子内源氨基、巯基发生副反应，标记特异性极强。

三、反应机理

Cy3‑NHS依靠琥珀酰亚胺酯的亲电取代反应，在pH7.5‑9.0弱碱性环境下，和蛋白赖氨酸残基、氨基修饰多肽与核酸表面的伯氨基发生反应，脱去N‑羟基琥珀酰亚胺小分子，生成稳定不可逆的酰胺键，反应条件温和，不易造成蛋白变性失活。

Cy3‑TFP ester四氟苯基酯活化基团，同样靶向伯氨基生成酰胺键；和NHS酯相比，苯环上氟原子的强吸电子效应，提升了活化酯在水溶液中的半衰期，水解速度明显放缓。实验过程中缓冲液孵育时间更长，标记容错率更高，非常适合反应速度较慢、孵育时长较长的偶联体系。

Cy3‑Azide叠氮基团在生理环境下化学惰性稳定，内源生物分子不会与其发生反应，拥有两套成熟反应路径。其一，Cu(I)离子催化条件下，与末端炔基发生CuAAC铜催化环加成反应；其二，无铜条件下和DBCO、BCN等环张力炔基发生SPAAC反应，生成稳定的三唑共价连接产物，是生物正交标记体系的核心探针。

四、相关试剂

Cy3-SE

Cy3-OSu

Cy3-TFP ester

Sulfo-Cy3-NHS

Cy3.5-NHS

Cy5-NHS

Cy5-TFP ester

Sulfo-Cy5-NHS

Cy2-NHS

Cy2-TFP ester

Cy7-NHS

Cy7-TFP ester

Cy3-STP ester

Cy3-PFP ester

Sulfo-Cy3-TFP ester

Cy3.5-TFP ester

Sulfo-Cy3.5-NHS

Cy5.5-NHS

Cy5.5-TFP ester

Sulfo-Cy5-TFP ester

上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理