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英文名称：Methyltetrazine-PEG12-NHS ester

中文名称：甲基四嗪-十二聚乙二醇-N-羟基琥珀酰亚胺酯

CAS号：2055646-25-6

分子式：C45H75N5O17

分子量：958.11

产品纯度：95%+

外观性状：淡黄色油状固体

储存条件：-20℃干燥避光密封储存，严格隔绝水汽、游离氨基与反式环辛烯类试剂，避免反复开盖接触空气，长期充入高纯氩气可稳定放置12个月以上

用途：通过NHS活性酯与生物分子表面伯氨基的特异性反应，将长亲水链甲基四嗪基团定点引入蛋白、抗体等底物，后续通过与反式环辛烯的快速无铜点击反应，实现低背景的生物正交荧光标记，长PEG链可大幅降低标记后的非特异性吸附

来源：陕西新研博美生物科技

产品介绍‌

2055646-25-6 Methyltetrazine-PEG12-NHS ester是面向低背景活细胞生物正交标记场景开发的长亲水链四嗪类活性标记试剂。该产品将高反应活性的甲基四嗪基团与NHS活性酯通过12个单元的长聚乙二醇亲水链共价连接，在完整保留甲基四嗪与反式环辛烯超快点击反应特性的同时，依托超长亲水PEG链消除了传统短链四嗪试剂标记后生物分子疏水聚集、非特异性吸附高的痛点，是活细胞表面膜蛋白原位生物正交标记的核心专用试剂。

作用机理‌

2055646-25-6的两步定点标记依托双官能团的分步特异性反应实现。步在弱碱性水相体系中，分子末端的NHS活性酯与目标蛋白、抗体表面的伯氨基发生高效亲核取代反应，生成稳定的酰胺键，将带有长PEG链的甲基四嗪基团定点连接到生物分子上；第二步在生理条件下，修饰了甲基四嗪的生物分子可与反式环辛烯修饰的荧光探针发生超快的逆电子需求狄尔斯-阿尔德环加成反应，反应速率是传统DBCO-叠氮点击反应的100倍以上，无需任何金属催化剂，即可在数分钟内完成靶标的特异性荧光标记，长PEG链在中间形成亲水间隔层，完全避免了四嗪母核的疏水特性对生物分子活性的影响。

性能参数与核心优势‌

2055646-25-6的纯度稳定在95%以上，不含游离甲基四嗪羧酸与NHS水解失活杂质，批次间的氨基标记活性与四嗪反应活性高度均一，相同实验条件下的蛋白氨基标记效率可达90%以上。相比传统短链Methyltetrazine-NHS ester，该产品的12单元长PEG链让标记后的蛋白水溶性提升了60%，非特异性吸附降低了75%，完全不会出现疏水聚集导致的蛋白沉淀失活问题。其与反式环辛烯的二级反应速率常数可达2000 M⁻¹s⁻¹，是所有无铜点击反应中速率最快的类型之一，低至纳摩尔级的探针浓度即可在5分钟内完成标记，大幅缩短活细胞实验的孵育时间，降低非特异背景的产生。

应用领域‌

2055646-25-6可用于活细胞膜蛋白的超快原位荧光标记。将该试剂与靶标一抗共孵育，在抗体表面定点引入长链甲基四嗪基团，纯化后得到四嗪修饰的一抗，再将其与活细胞孵育结合靶标膜蛋白，随后加入TCO修饰的荧光探针，数分钟内即可完成膜蛋白的特异性荧光标记，整个过程细胞活性几乎不受影响，超快的反应速度完全避免了传统慢反应点击标记中探针进入细胞产生的胞内背景。该产品也可用于治疗性抗体的位点特异性定点修饰。将该试剂与抗体的Fc段氨基进行可控反应，得到位点分布均一的甲基四嗪修饰抗体，后续与TCO修饰的药物分子偶联，制备得到DAR值高度均一的抗体药物偶联物，长PEG链的存在大幅提升了ADC分子的体内循环半衰期，降低了药物的非特异性毒副作用。该产品还可用于单细胞水平的快速生物正交多色标记。将该试剂标记的不同抗体与不同TCO荧光探针搭配，利用四嗪-TCO反应的超快动力学，在单细胞样本中实现3种靶标蛋白的同时快速标记，数分钟内即可完成多色荧光成像的样本制备，完全避免了传统多步标记过程中细胞状态的改变。

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（上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理，本品仅用于科研实验）