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中文名：AF488 马来酰亚胺，Alexa Fluor488 马来酰亚胺

英文名：AF488 MAL，AF 488 maleimide，Alexa Fluor488 MAL，AF488 maleimide

Molecular ｆormula：C31H27N4NaO12S2

Molecular weight：734.69

荧光颜色：亮绿色

活性基团：马来酰亚胺

反应靶点：游离巯基（半胱氨酸残基）

产品纯度：95%+

外观性状：亮橙红色结晶性粉末

储存条件：-20℃干燥避光密封储存，严格隔绝含巯基的试剂与强还原剂，避免反复冻融，长期充入高纯氩气可稳定放置12个月以上

用途：依托马来酰亚胺与游离巯基的特异性反应，将AF488高亮度绿色荧光团定点共价连接到蛋白、多肽、寡核苷酸修饰的巯基位点，制备位点、背景极低的绿色荧光标记生物分子，适配各类高灵敏度荧光成像与检测场景

来源：陕西新研博美生物科技

产品介绍‌

AF488 Mal是当前生物标记领域公认的高性能绿色荧光巯基活性试剂。该产品将Alexa Fluor 488荧光母核的高亮度、抗光漂白、低非特异吸附特性，与马来酰亚胺基团的巯基反应特异性深度结合，解决了传统异硫氰酸荧光素（FITC）类试剂标记位点随机、易水解、光稳定性差的痛点，是单分子荧光示踪、超高分辨成像等实验中绿色荧光标记的试剂。

作用机理‌

AF488 Mal的定点标记依托温和的迈克尔加成反应实现。在pH 6.5⁻⁷.5的近生理缓冲体系中，分子末端的马来酰亚胺双键可与生物分子表面的游离半胱氨酸巯基发生高特异性亲核加成，生成稳定的硫醚共价键。整个反应几乎不与蛋白表面的氨基、羧基等其他基团发生副反应，标记位点完全可控，不会破坏靶标生物分子的天然空间构象与生物活性。反应完成后，多余的未反应试剂可通过简单的凝胶过滤或超滤步骤完全去除，无需复杂的后续纯化操作。

性能参数与核心优势‌

AF488 Mal的纯度稳定在95%以上，无游离AF488荧光团与马来酰亚胺水解失活杂质，批次间的标记活性与荧光性能高度均一，相同实验条件下的游离巯基标记效率可达93%以上。相比传统FITC马来酰亚胺，该产品的荧光量子产率提升了42%，摩尔消光系数达到71000，相同浓度下的荧光亮度是FITC的1.6倍。分子母核上的多个磺化基团赋予其极强的亲水性，在纯PBS缓冲液中即可完全溶解，无需添加DMSO等有机助溶剂，完全避免了有机试剂导致的蛋白变性失活问题。同时它的抗光漂白性能远超同波段的其他绿色荧光染料，在共聚焦显微镜的连续激光照射下，荧光信号的半衰期是FITC的5倍以上，完全满足长时间活细胞动态成像的需求。极低的非特异性吸附特性让标记后的样本几乎没有弥散背景，成像信噪比相比传统绿色荧光标记提升了2.5倍。

应用领域‌

AF488 Mal可用于单分子水平的肌球蛋白运动示踪。将该试剂定点标记在肌球蛋白头部的特定位点半胱氨酸上，制备得到高亮度的荧光标记肌球蛋白，依托其的抗光漂白性能，可在全内反射荧光显微镜下长时间追踪单个肌球蛋白分子沿着肌动蛋白丝的运动轨迹，清晰捕捉到纳米级的运动步长，获得传统低亮度荧光染料无法采集到的单分子动态数据。该产品也可用于抗体的定点半胱氨酸荧光标记。将该试剂与通过定点突变引入单个半胱氨酸位点的重组抗体进行反应，得到DAR值严格为1的位点均一荧光标记抗体，完全避免了传统氨基随机标记导致的多个荧光团分布不均、抗体活性下降的问题，标记后的抗体在免疫荧光实验中特异性极强，几乎没有非特异染色背景。该产品还可用于巯基修饰寡核苷酸的绿色荧光标记。将该试剂与5'端修饰了巯基的寡核苷酸进行特异性偶联，制备得到位点的AF488荧光标记核酸探针，用于核酸凝胶电泳的条带检测，其亮度与稳定性远超传统SYBR类核酸染料，可实现低至皮摩尔级的核酸条带清晰显影。

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（上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理，本品仅用于科研实验）