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中文名称：AF488 叠氮，Alexa Fluor488 叠氮

英文名称：AF488-N3，azide AF488，AF488 azide，Alexa Fluor 488 N3，Alexa Fluor488 azide

CAS号：1679326-36-3

分子式：C24H18K2N6O10S2

分子量：692.76

Ex(nm)：495

Em(nm)：519

产品纯度：95%+

外观性状：亮橙红色结晶性粉末

储存条件：-20℃干燥避光密封储存，严格隔绝强还原剂与高压高温环境，避免反复冻融，长期充入高纯氩气可稳定放置12个月以上

用途：通过铜催化或无铜点击化学反应，将AF488高亮度绿色荧光团定点共价连接到带有炔基标记的生物分子上，实现低背景、高特异性的绿色荧光标记，适配活细胞成像、复杂生物样本示踪等多种场景

来源：陕西新研博美生物科技

产品介绍‌

AF488-N3是面向点击化学标记场景开发的高性能绿色荧光叠氮试剂。该产品将Alexa Fluor 488标志性的高亮度、抗光漂白、低非特异吸附特性与叠氮基团的点击反应特异性深度融合，解决了传统氨基标记试剂位点随机、易破坏生物分子活性的痛点，既可以通过铜催化点击反应完成固定样本的高效标记，也能通过无铜应变促进叠氮-炔环加成反应实现活细胞的无毒性标记，是当前点击化学体系中应用最广泛的绿色荧光探针之一。

作用机理‌

AF488-N3的定点标记依托点击化学反应的高特异性实现。在铜离子催化的体系中，分子中的叠氮基团可与生物分子上预先引入的端炔基团发生高效的Huisgen环加成反应，生成稳定的三唑共价键，反应几乎不与生物体内的任何天然基团发生副反应，标记位点完全可控。在活细胞等对铜毒性敏感的体系中，该试剂也可直接与DBCO等环辛炔修饰的生物分子发生无铜SPAAC反应，无需任何金属催化剂，在生理条件下即可快速完成标记，整个过程不会对细胞活性产生任何影响。两种反应路径生成的共价键都具有极高的化学稳定性，耐受后续的多步洗脱、变性处理，荧光信号几乎不会发生丢失。

性能参数与核心优势‌

AF488-N3的纯度稳定在95%以上，不含游离AF488荧光团与叠氮分解失活杂质，批次间的点击反应活性与荧光性能高度均一，相同实验条件下的炔基标记位点反应效率可达92%以上。相比传统FITC叠氮衍生物，该产品的荧光量子产率提升了40%，摩尔消光系数达到71000，相同浓度下的荧光亮度是FITC叠氮的1.6倍。分子母核上的多个磺化基团赋予其极强的亲水性，在纯PBS缓冲液中即可完全溶解，无需添加高比例的DMSO等有机助溶剂，完全避免了有机试剂导致的细胞毒性与蛋白变性问题。同时它的抗光漂白性能远超同波段其他绿色荧光叠氮染料，在共聚焦显微镜的连续激光照射下，荧光信号半衰期是FITC的5倍以上，完全满足长时间活细胞动态成像的需求。极低的非特异性吸附特性让标记后的样本几乎没有弥散背景，成像信噪比相比传统绿色荧光点击标记提升了2.3倍。

应用领域‌

AF488-N3可用于活细胞表面糖蛋白的代谢标记示踪。将非天然炔基糖与活细胞共孵育，让细胞自身代谢将炔基基团整合到细胞膜表面的糖蛋白上，再加入低浓度的AF488-N3进行无铜点击标记，即可在完全不影响细胞活性的前提下，实现细胞膜糖蛋白的高亮度绿色荧光标记，长时间追踪糖蛋白在细胞表面的转运与内吞动态过程，获得传统抗体标记无法实现的活细胞动态数据。该产品也可用于细胞增殖的EdU荧光检测。将EdU（5-乙炔基-2'-脱氧尿苷）掺入正在增殖的细胞新合成DNA中，固定通透后加入AF488-N3进行点击反应，即可高效标记增殖细胞的DNA，相比传统的Brdu检测方法，无需DNA变性步骤，操作流程大幅简化，染色信噪比显著提升，可区分处于不同增殖周期的细胞亚群。该产品还可用于炔基修饰核酸探针的绿色荧光标记。将AF488-N3与5'端修饰DBCO基团的寡核苷酸进行无铜点击反应，制备得到位点的AF488荧光标记核酸探针，用于荧光原位杂交实验，标记后的探针杂交特异性极强，几乎没有非特异结合背景，可清晰显示细胞内低丰度mRNA的亚细胞分布。

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（上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理，本品仅用于科研实验）