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AF488-NHS,AF488 N-羟基琥珀酰亚胺酯,高亮度绿色荧光氨基标记活性酯科研试剂
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详细内容
基础参数栏:
英文名:AF488-NHS,Alexa Fluor 488 NHS,AF488 NHS Ester,Alexa Fluor 488 NHS ester,AF 488 NHS ester,AF-488 NHS
中文名:AF488活性脂,AF488琥珀酰亚胺酯,AF488活性酯,Alexa Fluor 488 琥珀酰亚胺酯
CAS号:1374019-99-4
分子式:C25H17N3O13S2
分子量:631.54
EX/EM:495/519 nm
产品纯度:95%+
外观性状:亮橙黄色结晶性粉末
储存条件:-20℃干燥避光密封储存,严格隔绝水汽与游离氨基试剂,避免反复开盖接触空气,长期充入高纯氩气可稳定放置12个月以上
用途:通过活性酯与伯氨基的特异性反应,对氨基修饰的蛋白、抗体、多肽等生物分子进行定点AF488绿色荧光标记

产品介绍
AF488-NHS是面向通用型绿色荧光标记场景开发的高性能AF系列活性酯荧光试剂。该产品将光稳定性的AF488绿色荧光团与N-羟基琥珀酰亚胺活性酯基团通过稳定的共价结构结合,在完整保留AF488高荧光量子产率特性的同时,赋予分子水相兼容的氨基反应活性,无需复杂的预活化步骤即可直接用于各类含氨基生物分子的定点荧光修饰,是免疫荧光、流式细胞术等常规生物实验中应用最广泛的绿色荧光标记试剂之一。
作用机理
AF488-NHS的定点荧光标记依托NHS活性酯的亲核取代反应实现。在弱碱性水相缓冲体系中,分子末端的NHS活性酯基团可与目标生物分子表面的伯氨基发生温和的亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,将AF488绿色荧光团定点连接到预设位点。整个反应过程条件温和,不会破坏抗体、蛋白等生物分子的天然活性,反应副产物仅为N-羟基琥珀酰亚胺,可通过简单的超滤或透析步骤完全去除,不会对后续实验体系引入额外杂质干扰。
性能参数与核心优势
AF488-NHS的纯度稳定在95%以上,不含游离AF488荧光团与水解杂质,批次间的NHS活性与荧光性能高度均一,相同实验条件下的氨基标记效率可达91%以上。相比传统FITC-NHS试剂,该产品的抗光漂白性能提升了2.5倍,荧光量子产率提升了30%,495nm的激发波长适配绝大多数常规荧光设备的488nm激光通道,无需额外调整仪器参数即可直接使用。该分子的亲疏水性经过优化,在水相体系中的水解半衰期可稳定维持在数小时,兼顾了水相反应兼容性与标记效率,大幅降低了常规绿色荧光活性酯试剂易快速水解失效的使用门槛。
应用领域
AF488-NHS可用于抗体的高亮度绿色荧光标记。将该试剂与纯化后的抗体在弱碱性缓冲体系中反应,制备得到的AF488标记抗体可直接用于免疫荧光染色与流式细胞检测,获得比FITC标记抗体更稳定、信噪比更高的荧光信号。该产品也可用于多肽探针的绿色荧光修饰。将该试剂与氨基修饰的多肽在温和条件下反应,高效制备得到AF488标记的多肽探针,用于多肽在细胞内的转运与分布示踪实验。该产品还可用于多色荧光体系的基础通道标记。将该试剂标记的生物探针与其他不同波段的荧光探针配合使用,构建多色无串扰的荧光检测体系,满足多靶点同步观测的实验需求。

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(上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理,本品仅用于科研实验)
热门标签:AF488-NHS,AF488,N-羟基琥珀酰亚胺酯













