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中文名称：AF647琥珀酰亚胺酯，AF647活性脂

英文名称：AF647-NHS，AF647 NHS Ester，Alexa Fluor 647 SE

CAS号：407627-60-5

分子式：C₄₀H₄₉N₃O₁₆S₄

分子量：956.09

激发波长：649nm

发射波长：671nm

产品纯度：95%+

外观性状：深蓝色结晶性粉末

储存条件：-20℃干燥避光密封储存，全程隔绝水汽防止NHS活性酯提前水解失活，远离强淬灭剂与高浓度游离氨基试剂，长期充入高纯氩气可稳定放置12个月以上

用途：在温和生理条件下与蛋白、抗体、寡核苷酸的游离伯氨基发生共价偶联，构建远红光区低背景高亮度荧光标记探针

产品介绍‌

AF647-NHS是针对远红光荧光标记场景定向开发的活性酯类荧光试剂，将高亮度远红光荧光团AF647与高活性N-羟基琥珀酰亚胺酯共价偶联。该产品保留了AF647荧光团的光稳定性与高量子产率特性，末端的NHS活性酯可在温和水相条件下与伯氨基发生特异性酰胺化反应，无需复杂合成步骤即可将远红光荧光基团定点引入靶标分子。该试剂的激发发射波长处于远红光低自发荧光区间，可有效避开生物样本中细胞自发荧光的干扰，大幅提升复杂生物样本中荧光检测的信噪比，是高灵敏度免疫荧光成像、流式细胞术、单分子示踪实验的核心专用功能标记试剂。

作用机理‌

该试剂的定点荧光标记依托氨基特异性亲核取代反应机制实现，在pH 7.0-8.5的弱碱性缓冲体系中，试剂末端的NHS活性酯与靶标分子表面的游离伯氨基发生特异性亲核取代反应，生成稳定的酰胺键，将AF647远红光荧光基团共价连接到靶标分子的预设位点。标记完成后的AF647荧光团在650nm波长激发下，可稳定发射665nm的远红光信号，该波段远离生物样本中蛋白、核酸的自发荧光区间，几乎不会受到样本背景荧光的干扰，可在复杂细胞裂解液、组织切片等体系中实现低背景的高灵敏度荧光信号采集。

性能参数与核心优势‌

该产品的纯度稳定在95%以上，未偶联NHS的游离AF647荧光杂质占比低于2%，批次间的NHS取代率与荧光量子产率高度均一，后续标记实验的批间荧光信号差异小于5%。相比传统的Cy5-NHS荧光标记试剂，该产品的荧光量子产率提升了25%，光稳定性提升了40%，在共聚焦显微镜长时间连续扫描下，光漂白速率降低了60%。该试剂标记得到的荧光探针在血清中72小时的荧光稳定性超过99%，几乎不会发生荧光团解离漏出的问题，远红光波段的检测背景比可见光区荧光标记试剂降低了90%，适配高灵敏度低丰度靶标的荧光检测需求。

应用领域‌

该产品广泛应用于高分辨率组织切片多重免疫荧光成像，将该试剂标记在靶标蛋白的特异性一抗上，与其他不同发射波长的荧光标记抗体配合使用，可在同一张病理组织切片中同时完成3-4种不同靶标蛋白的多色荧光成像，清晰解析肿瘤组织微环境中不同免疫细胞的分布与互作关系，完全避免了可见光荧光通道的组织自发荧光背景干扰。适配高参数流式细胞术的多色panel构建，将该试剂用于稀有免疫细胞表面标志物的抗体标记，依托远红光通道的低背景特性，可在流式检测中分选出外周血中丰度低于0.01%的稀有循环肿瘤细胞，大幅提升稀有细胞的检测灵敏度。也可用于单分子水平的蛋白动态示踪实验，将该试剂标记在活细胞内的靶标蛋白上，依托AF647的光稳定性，可在全内反射荧光显微镜下长时间追踪单个靶标蛋白在细胞膜上的扩散运动轨迹，解析膜蛋白的动态调控机制。

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Low background far-red fluorescent labeling reagent

AF647-NHS，CAS 407627-60-5

High photostability 650/665nm fluorophore

Immunofluorescence imaging active ester reagent

Flow cytometry far-red labeling intermediate

No non-specific adsorption AF647 derivative

650nm excitation NHS ester fluorescent probe

Single molecule tracking fluorescent building block

Multiplex immunofluorescence labeling reagent

AF647-NHS，protein labeling reagent

Far-red low auto-fluorescence marker

（上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理，本品仅用于科研实验）