英文名称PODi-3,yellow fluorescent nucleic acid stain

中文名称PODi-3 黄色荧光核酸染色剂

CAS号154757-99-0

分子式C₄₅H₅₈I₄N₆O₂

分子量1222.61

外观性状黄棕色至棕色固体粉末

激发/发射波长Ex 533–534 nm / Em 570–573 nm

溶剂DMSO（推荐先溶于DMSO再稀释至缓冲液）

储存条件-20℃以下，干燥、避光、密封保存，避免反复冻融

用途核酸荧光染色、凝胶电泳成像、细胞核复染、流式细胞术、微阵列检测、细胞活力评估

来源陕西新研博美生物科技

产品介绍

PODi-3是双菁类（Cyanine Dimers）荧光探针家族的明星成员，由两个单菁染料分子（TO-PRO家族）通过柔性连接臂对称连接而成，整体携带4个正电荷。它有一个极其反直觉的特性——游离状态下几乎不发光，一旦嵌入DNA双螺旋，荧光瞬间暴涨100至1000倍。这种"藏而不发、触而惊艳"的机制，使其信噪比远超溴化乙锭（EB），灵敏度可达皮克级别，甚至能检测单条DNA链。黄色荧光（534/570 nm）在可见光谱中独占一席之地，与绿色、红色、远红外探针完美错开，是多色共定位实验的理想第三通道。

作用机理

PODi-3的高效源于双重协同机制。

重：静电锁定。4个正电荷与DNA磷酸骨架的负电荷强力吸引，亲和力比单体染料（如YOYO-1）高出约100倍，一旦结合极难脱落，染色稳定性远超传统染料。

第二重：构象限制致荧光开启。游离态时，分子在溶液中自由旋转，激发能通过非辐射跃迁耗散，荧光几乎为零。嵌入DNA双螺旋后，分子构象被刚性锁定，非辐射通道关闭，荧光量子产率从近乎零跃升至0.46——这就是千倍荧光增强的物理本质。

关于细胞膜通透性，需特别注意：多数文献将PODi-3归类为细胞膜不可渗透性（cell-impermeant）染料，主要用于固定细胞或死细胞的核酸染色。但亦有文献指出其可穿透活细胞膜进行染色，实际表现取决于实验条件与细胞类型。建议用户根据具体实验目的（活细胞成像vs固定细胞复染）先行验证。

性能参数与核心优势

荧光增强倍数高达100–1000×，远超EB的约20×；DNA亲和力为单体染料的100倍，染色稳定不易脱色；消光系数146,400 M⁻¹cm⁻¹，强光吸收能力使低浓度即可获得清晰成像；量子产率0.46，在双菁类染料中处于高位；光谱位置534/570 nm（黄色），多色实验第三通道。

三大核心优势：其一，信噪比极高——游离态无荧光意味着背景几乎为零，这是所有"插入型"核酸染料中最干净的信号来源之一；其二，光稳定性——双菁结构抗光漂白能力强于单体，适合长时间共聚焦采集与Z-stack三维重建；其三，多色兼容性完美——黄色通道与FITC（绿色）、TRITC/Cy3（红色）、Cy5（远红外）光谱分离度，四色同时标记互不干扰。

应用领域

，琼脂糖凝胶核酸染色。PODi-3是EB的升级替代方案，灵敏度更高、背景更低，尤其适合低浓度DNA样品（如PCR产物、质粒微量提取物）的可视化检测。

第二，荧光显微镜细胞核复染。黄色荧光与DAPI（蓝色）或抗体标记（绿色/红色）形成三色对比，清晰勾勒核形态与染色体结构，适用于有丝分裂观察与核型分析。

第三，流式细胞术。用于细胞周期分析与细胞核计数，黄色荧光通道与常用的FITC/PE通道正交，可在同一管中同时检测表面标记与DNA含量。

第四，微阵列与核酸杂交。极低背景使其成为基因芯片、Northern blot等杂交实验中信号检测的理想选择。

第五，细胞活力评估。联合膜通透性核酸染料（如PODi-1，蓝色），可区分活细胞（仅PODi-1阳性）与死细胞（PODi-1+PODi-3双阳性），快速评估细胞活力与凋亡比例。

使用建议

储备液建议以5 mM浓度溶于DMSO，-20℃避光分装保存，避免反复冻融。工作浓度通常为1–10 µM，用PBS或Tris-HCl（pH 7.0–8.5）稀释。染色时间室温15–60分钟，固定细胞可适当缩短。由于染料对光敏感，全程应避光操作。

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（文章资料汇总来源于：陕西新研博美生物科技小编木木，本品仅用于科研实验）