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Biotin (Hydroxyprolinol) CPG 1000,羟基脯氨醇属于非核苷类修饰结构
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【英文名称】Biotin (Hydroxyprolinol) CPG 1000【中文名称】生物素羟基脯氨醇CPG 1000【外观性状】白色至类白色固体粉末【纯度】≥95%(HPLC-MS + ¹H NMR双重质控)【孔径】1000 Å(适配最长120 mer寡核苷酸合成)【典型载荷】70–80 µmol/g【溶剂】DMSO【储存条件】-20°C避光干燥密封保存,惰性气体保护优先,避免反复冻融,有效期24个月【用途】自动化合成3'端携带生物素的寡核苷酸探针,用于链霉亲和素亲和纯化、Southern/Northern blot、ELISA、SELEX筛选、PLA/PEA邻近分析等科研场景试剂仅用于科研实验【来源】:陕西新研博美生物科技

产品介绍
Biotin (Hydroxyprolinol) CPG 1000是专为寡核苷酸固相合成设计的功能性载体。它以1000Å大孔径可控孔度玻璃(CPG)为骨架,表面通过羟基脯氨醇(hydroxyprolinol)连接臂共价键合生物素(Biotin)亲和标签。
CPG基质机械强度极高,在有机溶剂中不溶胀,化学稳定性,可耐受亚磷酰胺合成中的酸、碱、有机溶剂等苛刻条件。1000Å的大孔径结构确保长链寡核苷酸(最长可达120个碱基)合成时,反应试剂能高效扩散至载体内部,偶联效率不因链长增加而骤降。
而羟基脯氨醇连接臂是这款产品的核心设计亮点。相比传统的琥珀酸或己二酸连接臂,羟基脯氨醇属于非核苷类修饰结构,其手性骨架在合成和解保护条件下均表现出的化学稳定性,不易发生异构化或降解,确保生物素标记的完整保留。这意味着——你合成出来的每一条寡核苷酸,3'端的生物素都在,且活性完好。
作用机理:从合成到捕获的完整链路
Biotin (Hydroxyprolinol) CPG 1000的工作流程可分为三步,环环相扣。
步——自动化固相合成。在DNA合成仪上,以Biotin (Hydroxyprolinol) CPG 1000为起始点,遵循标准亚磷酰胺化学法,经脱DMT、偶联、盖帽、氧化循环,逐步添加A、T、C、G碱基,链从3'端向5'端延伸。合成过程中,羟基脯氨醇连接臂稳定承受所有反应条件,生物素基团完整保留在3'末端。整个过程与常规核苷碱基的偶联条件完全相同,无需额外优化合成程序。
第二步——裂解与脱保护。合成结束后,使用浓氨水或AMA(浓氨水/40%甲胺=1:1)处理,将寡核苷酸从CPG上裂解下来,并去除所有保护基团。生物素经羟基脯氨醇臂的保护,在碱性裂解条件下不脱落、不降解。
第三步——链霉亲和素亲和捕获。生物素标记的寡核苷酸与链霉亲和素(Streptavidin)包被的磁珠或酶标板孵育。生物素与链霉亲和素之间的结合常数(Kd ≈ 10⁻¹⁵ M)是已知最强的非共价相互作用之一,这意味着捕获效率接近100%,背景信号趋近于零。
三项不可替代的核心优势
,羟基脯氨醇连接臂,稳定性碾压传统设计。传统生物素CPG多采用琥珀酸连接臂,该连接臂在氨水裂解和高温脱保护条件下容易断裂,导致生物素脱落、标记不完整。羟基脯氨醇的手性刚性结构有效抵抗了合成全流程中的酸性和碱性条件,生物素脱落率极低。对于长链寡核苷酸(>80 mer)合成而言,这一优势尤为关键——链越长,合成周期越久,连接臂越容易出问题,而羟基脯氨醇从根本上解决了这个痛点。
第二,1000Å大孔径,长链合成无压力。500Å孔径适用于50 mer以下的短链合成,而1000Å孔径可支持最长120 mer的寡核苷酸合成,减少空间位阻,提高偶联效率和产率。对于需要长探针的应用场景(如Scorpion引物、长臂分子信标、邻近延伸分析探针),1000Å是可靠的选择。
第三,标准合成兼容,零学习成本。偶联条件与常规核苷碱基完全相同,解保护条件也与标准受保护核苷碱基一致,可直接整合至现有自动化合成平台,无需更换程序、无需额外优化。DMT纯化后酸处理去DMT,即可得到高纯度3'生物素标记寡核苷酸。
应用领域
Southern/Northern Blot与微阵列芯片。合成3'端生物素标记的DNA或RNA探针,通过链霉亲和素-HRP或链霉亲和素-荧光染料进行检测,信号强、背景低,是经典分子杂交实验的标准配置。
SELEX核酸适配体筛选。在指数富集配体系统进化(SELEX)过程中,利用生物素-链霉亲和素系统固定目标核酸序列或去除未结合序列,是构建高亲和力适配体的核心策略。
PLA/PEA邻近分析。制备生物素化探针用于蛋白质-蛋白质相互作用或蛋白质-DNA相互作用的邻近连接/邻近延伸分析,配合链霉亲和素磁珠实现超灵敏检测。
单分子研究。作为标记工具用于单分子荧光显微镜、磁镊或光镊实验中的核酸操控与定位,生物素-链霉亲和素的高亲和力确保分子在力场作用下不脱落。
ELISA与化学发光检测。构建生物素标记的捕获探针或检测探针,通过链霉亲和素-酶偶联物实现信号放大,用于病原体核酸检测、基因分型等分子诊断场景。
DNA纳米技术与DNA折纸术。在DNA origami或纳米结构自组装中,作为功能化模块引入生物素标签,实现后续的表面固定、分子递送或靶向修饰。
合成与使用条件
偶联条件:标准偶联,与正常核碱基完全兼容。裂解条件:浓氨水,室温2小时;或AMA混合物,65°C下10分钟。脱保护条件:与所用受保护核碱基的脱保护条件相同。质量控制:NMR ¹H、HPLC-MS验证结合效率≥95%,并通过寡核苷酸合成功能测试。规格提供:1mg、10mg、25mg、100mg,亦可根据需求定制。

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(文章资料汇总来源于:陕西新研博美生物科技,本品仅用于科研实验)
热门标签:Biotin,(Hydroxyprolinol),CPG,1000













