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FITC-AVIDIN,异硫氰酸荧光素标记亲和素,打造信号放大的利器
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详细内容
【名称】
中文名称:异硫氰酸荧光素标记亲和素
英文名称:FITC-AVIDIN,FITC-Avidin,Fluorescein Avidin
【处置与储存】
纯度:95%,详情可在线咨询
保存建议: 需要存储在-20°C,避光,避湿,避免反复冻融。
【产品介绍】
FITC-Avidin是将异硫氰酸荧光素(FITC)通过异硫氰酸酯基团(-NCS)与亲和素(Avidin)表面赖氨酸残基的氨基(-NH₂)发生共价偶联,形成稳定硫脲键而制备的荧光标记蛋白。亲和素源自蛋清,为四聚体糖蛋白,分子量约68 kDa,每个亚基含一个生物素结合位点。优质产品的标记率通常为3–5个FITC分子/亲和素四聚体,亲和素生物素结合活性保持率不低于85%。
部分提供的FITC-Avidin D为亲和素D(链霉亲和素变体),等电点pI降至约6.5,经脱糖基化处理,非特异性吸附显著降低,背景更干净。
光学参数
最大激发波长495–500 nm,最大发射波长514–521 nm,发出明亮绿色荧光,与流式细胞仪FITC通道完全匹配。荧光量子产率高,光稳定性较好,适合常规蓝光激发条件下的检测。
核心机制
其检测原理依赖生物素-亲和素系统——亲和素对生物素的解离常数Kd≈10⁻¹⁵ M,属于已知最强的非共价相互作用之一。实验中,目标分子预先通过化学偶联或基因工程标记生物素,随后加入FITC-Avidin,形成"荧光素-亲和素-生物素-目标蛋白"复合物,实现特异性荧光标记。一个亲和素四聚体可同时结合4个生物素分子,具备天然的信号放大能力。

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