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AF488-PEG12-DBCO,是生命科学领域无铜点击荧光标记的核心工具试剂
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详细内容
名称】
-中文名称:AF488-十二聚乙二醇-二苯基环辛炔
英文全称:AF488-PEG12-DBCO,Alexa Fluor 488-PEG12-DBCO,Alexa Fluor 488-PEG12-Dibenzocyclooctyne
外观性状:橙黄色至橘红色固体粉末
【处置与储存】
纯度:95%,详情可在线咨询
保存建议: 需要存储在-20°C,避光,避湿,避免反复冻融。
【产品介绍】
AF488-PEG12-DBCO是一种模块化生物正交标记试剂,由三个功能单元共价组装而成:Alexa Fluor 488(AF488)荧光团、十二聚乙二醇链(PEG12)和二苯并环辛炔(DBCO)点击化学基团。其本质是在AF488 DBCO的基础上,引入PEG12亲水连接臂,以改善水溶性、降低空间位阻、减少非特异性吸附。
AF488为磺化罗丹明衍生物,分子量约720,具有明亮、光稳定、亲水的荧光特性,最大激发波长495 nm,最大发射波长519 nm,荧光量子产率约0.91,摩尔消光系数约71,800 L·mol⁻¹·cm⁻¹。PEG12链由12个乙二醇重复单元构成,分子量约530,提供约4.5 nm的柔性间隔距离。DBCO为应变促进的环炔烃,可与叠氮基团发生无铜点击反应(SPAAC),反应速率常数可达1–3 M⁻¹·s⁻¹,远高于铜催化点击反应。
化学反应机制
该试剂的核心反应为应变促进的叠氮-炔烃环加成反应(SPAAC)。DBCO环因环张力在无金属催化条件下即可与叠氮基团(-N₃)高效反应,生成稳定的三唑键连接产物。反应在生理pH(7.2–7.4)、室温或37℃条件下即可进行,数小时内完成,无需铜催化剂,避免了铜离子对活细胞的毒性。
PEG12连接臂的引入不改变DBCO与叠氮的反应动力学,但显著改变了试剂的物理行为。PEG链的高亲水性使整分子在水溶液中保持良好溶解性,减少了荧光团与目标分子之间的空间位阻,提高了标记效率。同时,PEG链形成的水化层可有效抑制非特异性蛋白质吸附,这在活细胞和体内实验中尤为关键。

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