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6-TAMRA-NHS,150810-69-8,一种带有胺反应基的荧光染料
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详细内容
试剂 | 基础知识概述(部分):
英文名称:6-TAMRA-SE,6-TAMRA-NHS,TAMRA NHS ester,
6-Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester
中文名称:四甲基罗丹明-NHS 活化酯,6-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯
CAS:150810-69-8
分子式:C29H25N3O7
分子量:527.53
试剂 | 结构式:

试剂 | 反应机理(部分):
6-TAMRA-SE(6-Carboxytetramethylrhodamine succinimidyl ester),全称6-羧基四甲基罗丹明琥珀酰亚胺酯,是一种橙红色荧光标记试剂。其分子结构以四甲基罗丹明(TAMRA)为荧光发色团,6位羧基通过连接臂与N-羟基琥珀酰亚胺(NHS)酯偶联。
6-TAMRA-SE由三个功能部分组成:TAMRA荧光团、连接臂和NHS活性酯基团。TAMRA部分提供橙红色荧光信号,连接臂将荧光团与活性酯基团隔开以减少空间位阻,NHS酯基团则是与靶标分子发生偶联反应的功能端。
NHS酯基团在弱碱性条件下(pH 7.0-9.0)与伯胺基(-NH₂)发生亲核取代反应,生成稳定的酰胺键,同时释放N-羟基琥珀酰亚胺。该反应具有以下特点:反应速度快,在pH 8.0-8.5时半衰期约为数分钟至数十分钟;反应专一性高,主要与伯胺反应,在生理pH下与仲胺的反应极慢;产物稳定,酰胺键在常规实验条件下不易水解。
反应条件
典型反应体系:将6-TAMRA-SE溶于无水DMSO或DMF中配制成储存液(通常10-20 mM),加入含伯胺基的靶标分子溶液中,调节pH至8.0-8.5(常用0.1 M碳酸氢钠缓冲液或0.1 M硼酸钠缓冲液),室温反应30-60分钟。反应完成后通过凝胶过滤、透析或HPLC纯化去除未反应的游离染料。
染料与蛋白的摩尔比(D/P比)通常控制在3:1至10:1之间,过高的D/P比可能导致荧光自淬灭或蛋白活性丧失,过低则标记效率不足。
6-TAMRA-SE偶联后的荧光探针具有以下光学参数:激发波长552 nm,发射波长578 nm,斯托克斯位移约26 nm,荧光量子产率中等。TAMRA的光稳定性优于FITC,但弱于Alexa Fluor 555和Cy3等新型染料。其吸收和发射光谱位于橙红色区域,与绿色荧光探针(如FITC、AF488,Ex/Em约495/519 nm)的通道分离度良好,适合双色或多色荧光实验。
试剂 | 细节注意(部分):
1.固体/粉末
2.溶于大部分有机溶剂,溶于水
3.纯度标准95%+
4.保存建议:需要存储在-20°C,避光,避湿的环境,避免反复冻融。从冰箱取出产品后,置于室温回温至少30min-1h,再开盖,以避免受潮。
5.注意事项:仅用于科学研究,不作为其它用途。

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(文章资料汇总来源于:陕西新研博美生物科技小编木木)
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