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Biotin LEL,生物素标记的番茄凝集素,一种将生物素分子共价偶联至番茄凝集素的复合物
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详细内容
中文名:生物素标记的番茄凝集素,Biotin标记番茄凝集素,生物素 LEL,生物素 Tomato lectin
英文名:Biotin LEL,Biotin Tomato lectin,Biotinylated Lycopersicon Esculentum (Tomato) Lectin (LEL, TL)
反应机理:
在糖生物学、细胞生物学及材料科学领域,Biotin LEL(生物素标记的番茄凝集素)作为一种高度特异性的糖结合探针,正发挥着越来越重要的作用。其独特的糖结合特性、信号放大能力及多平台兼容性,使其成为研究糖蛋白分布、细胞膜糖基化模式及糖-蛋白相互作用的关键工具。
Biotin LEL的组成与特性
Biotin LEL是一种通过化学偶联技术将生物素分子共价连接至番茄凝集素(LEL)的复合物。LEL来源于番茄(Lycopersicon esculentum),属于单亚基糖蛋白,由约等量的蛋白质和碳水化合物构成,其中糖类部分以85%阿拉伯糖和15%半乳糖为主。这种独特的分子构成赋予了LEL的糖结合特异性。
LEL的核心功能是通过其糖结合结构域特异性识别α-1,3-甘露糖、N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)等糖基化修饰,能够靶向结合血型糖蛋白、Tamm-Horsfall糖蛋白等含特定糖链的分子。生物素标记则通过N-羟基琥珀酰亚胺酯(NHS)活化法实现,严格调控反应条件(如pH值、温度、摩尔比),确保凝集素的糖结合活性不受影响。
Biotin LEL试剂纯度≥95%,常温下呈液体或冻干粉状态,可溶于水及极性有机溶剂(如DMSO、乙醇)。储存需在-20℃避光干燥环境中,复溶后需分装冷冻以避免反复冻融导致的活性下降。
Biotin LEL的核心功能与应用
1. 糖基化结构特异性识别
Biotin LEL的核心优势在于其能够特异性识别GlcNAc及其寡聚体,这一特性使其成为研究糖蛋白分布和细胞膜糖基化模式的理想工具。在免疫组织化学(IHC)和免疫细胞化学(ICC)实验中,Biotin LEL可用于组织切片或细胞样品的糖基化标记。实验流程包括脱蜡水化、抗原修复、非特异性结合封闭、Biotin LEL孵育及洗涤后加入链霉亲和素-酶/荧光探针复合物进行显色或成像。通过这程,研究人员可以清晰地观察到细胞表面特定糖链的分布情况,为解析细胞间的相互作用和信号传导机制提供重要信息。
2. 信号放大能力
生物素标记赋予LEL与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)结合的能力,二者解离常数(Kd)低至10⁻¹⁵ M,形成“凝集素-生物素-链霉亲和素-检测模块”的信号放大体系。在免疫荧光实验中,通过荧光标记的链霉亲和素可实现一级信号放大;若采用“生物素化二抗-链霉亲和素-酶”的多级体系,则可通过酶促反应(如HRP催化DAB显色)实现指数级信号增强,适用于低丰度靶标的检测。这种信号放大能力显著提高了检测的灵敏度,使得研究人员能够更准确地检测到低表达水平的糖蛋白。
产品形式:
1.外观为固体/粉末
2.溶于大部分有机溶剂,溶于水
3.纯度标准95+,详情可在线咨询
保存建议:避免反复冻融,避光避湿保存,储液应该立即使用,-20℃以下冰冻。从冰箱取出产品后,置于室温回温至少30min-1h,再开盖,以避免受潮。
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