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Desthiobiotin-PNB ester,脱硫生物素-对硝基苯酯,可用于抗体的标记和修饰
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详细内容
中文名:脱硫生物素-对硝基苯酯,脱硫生物素-PNB酯
英文名:Desthiobiotin-PNB ester
分子式:C16H21N3O5
分子量:335.36
Purity:95%+
Appearance:solid/powder
Store at - 20 ℃ as much as possible
结构式:
![[图片]](https://q8.itc.cn/images01/20260415/a510496266674ceb8a7b625432daf53e.png)
产品介绍:
在生物化学与分子生物学领域,工具试剂的创新是推动研究突破的关键。Desthiobiotin-PNB ester(脱硫生物素-PNB酯)作为一种结合脱硫生物素与对硝基苯甲酸酯(PNB酯)特性的化学修饰试剂,凭借其可逆结合、光敏可控反应及高特异性标记等优势,已成为蛋白质标记、亲和纯化、药物递送及光可裂解探针设计等领域的核心工具。
化学结构与基本性质
Desthiobiotin-PNB ester的分子式为C₁₆H₂₁N₃O₅,分子量约为335.36。其结构由两部分组成:
脱硫生物素:作为生物素的衍生物,脱硫生物素去除了硫原子,保留了基本环状结构,仍能与亲和素或链霉亲和素结合,但亲和力较弱(Kd≈10⁻¹¹ M,而生物素为10⁻¹⁵ M)。这种特性使其可通过温和条件(如低浓度游离脱硫生物素或弱酸性缓冲液)实现目标分子的可逆洗脱,避免强变性剂对生物活性的破坏。
PNB酯基团:对硝基苯甲酸酯(PNB酯)是一种光敏基团,可在350–365 nm紫外光照射下发生光解反应,释放活性羧基基团。这一特性使其成为光可裂解探针的理想选择,可在特定时间和位置引发化学反应,实现生物分子的可控标记或交联。
Desthiobiotin-PNB ester通常为白色或黄色固体粉末,溶于二 氯甲烷、DMSO、水等常规有机溶剂。其储存条件需严格避光、干燥,并在-20℃下保存,以防止分解或变质。
核心功能与应用
1. 生物分子标记与修饰
Desthiobiotin-PNB ester通过PNB酯与含氨基的分子(如蛋白质、核酸)反应,形成稳定的酰胺键,实现高特异性标记。这一过程可通过监测对硝基苯酚(黄色副产物)的紫外吸收(400–410 nm)实时追踪,确保修饰效率与均匀性。例如:
蛋白质标记:通过PNB酯与赖氨酸残基的氨基反应,实现蛋白质的脱硫生物素化,用于后续亲和纯化或检测。
核酸修饰:与氨基修饰的核酸(如氨基-dTTP标记的DNA)结合,构建核酸-蛋白质复合物研究模型。
2. 亲和纯化与可逆捕获
脱硫生物素的弱亲和力与PNB酯的特异性反应协同作用,显著降低背景噪声,提升实验灵敏度。例如:
目标分子分离:将脱硫生物素化分子固定于链霉亲和素磁珠或琼脂糖树脂,通过温和洗脱条件(如2–5 mM脱硫生物素溶液)回收目标分子,适用于活性蛋白质或脆弱复合物的分离。
动态蛋白互作研究:在活细胞中标记目标蛋白的脱硫生物素-PNB酯,通过局部紫外光激活后,利用链霉亲和素磁珠捕获互作蛋白,结合质谱分析揭示时序性相互作用网络。
![[图片]](https://q3.itc.cn/images01/20260415/b33e02d303da4a46a01f547ff5f3ff0e.jpeg)
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(文章资料汇总来源于:陕西新研博美生物科技小编木木)
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