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41994-02-9,Biotin-TYRAMIDE,可与荧光或金颗粒等显色剂结合
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详细内容
英文名称:Biotin-TYRAMIDE,Biotin-Tyramide,Biotin-TSA
中文名称:Biotin-酪胺,生物素酪胺
CAS 号:41994-02-9
分子式:C18H25N3O3S
分子量:363.47
Purity:95%+
Appearance:solid/powder
Store at - 20 ℃ as much as possible
结构式:
![[图片]](https://q0.itc.cn/images01/20260407/27c4ab474682487b9c52469b09e76380.png)
产品介绍:
Biotin-Tyramide(生物素-酪胺)作为一种基于酪胺信号放大(TSA)技术的核心探针,通过酶催化沉积机制,将检测灵敏度提升至单分子水平,成为免疫组化(IHC)、原位杂交(ISH)及流式细胞术等领域的重要工具。
Biotin-Tyramide的分子设计巧妙结合了生物素(Biotin)与酪胺(Tyramide)两种功能基团:
生物素基团:作为小分子维生素(维生素H),生物素与链霉亲和素(Streptavidin)或亲和素(Avidin)具有极高的亲和力(解离常数Kd≈10⁻¹⁵ mol/L),形成稳定的非共价复合物。这一特性使生物素成为生物标记领域的“黄签”,可通过链霉亲和素偶联的荧光染料、酶或胶体金等实现信号的多样化检测。
酪胺基团:酪胺是一种含酚羟基的苯乙胺衍生物,在辣根过氧化物酶(HRP)和过氧化氢(H₂O₂)存在下,可被氧化为高活性的自由基中间体。该中间体能迅速与邻近蛋白质中的酪氨酸残基发生共价结合,将生物素稳定沉积在目标分子周围,实现信号的局部放大。
化学键连接:生物素与酪胺通过柔性连接臂(如聚乙二醇,PEG)共价结合,既保留了生物素的结合能力,又确保了酪胺的酶促反应活性。连接臂的柔韧性减少了空间位阻,提升了标记效率。
反应机制:TSA技术的“三级放大”原理
Biotin-Tyramide的核心功能依赖于TSA技术的酶催化沉积机制,其反应流程可分为三步:
HRP催化氧化:在H₂O₂存在下,HRP(通常通过特异性一抗或探针结合至目标分子)催化酪胺的酚羟基氧化,生成高反应活性的自由基中间体。这一过程无需金属催化剂,条件温和(pH 7.0-8.0,室温),生物相容性。
共价沉积:自由基中间体与目标分子周围50-200 nm范围内的蛋白质酪氨酸残基发生共价结合,形成稳定的共价键。由于自由基的短寿命(纳米秒级)和高反应性,沉积仅发生在HRP作用位点,确保特异性和低背景。
信号放大:单个HRP分子可催化数百个Biotin-Tyramide分子沉积,使生物素标记信号增强数十至数百倍。例如,在乳腺癌HER2蛋白检测中,传统荧光二抗法仅能识别中高表达样本,而TSA技术结合Biotin-Tyramide可清晰显示低表达细胞的膜定位信号。
![[图片]](https://q5.itc.cn/images01/20260407/a90a443ace204b0ab15f6df83bc16b4a.jpeg)
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