一、名称：

中文名：AF532琥珀酰亚胺酯，AF532活性酯

英文名：AF532-NHS，AF532 NHS，Alexa Fluor 532 NHS，Alexa Fluor 532 NHS ester，AF532 N-hydroxysuccinimide ester

CAS：477876-64-5

分子式：C34H33N3O11S2

分子量： 723.77

激发波长Ex(nm)：530

发射波长Em(nm)：555

结构式：

二、反应机理：

AF532-NHS（Alexa Fluor 532 N-hydroxysuccinimide ester），作为一种基于磺化罗丹明衍生物的高性能荧光标记试剂，凭借其独特的光学特性、高效的化学偶联能力及广泛的兼容性，正成为连接微观分子世界与宏观观测技术的“桥梁”，为从单分子追踪到材料功能化研究提供关键工具。

分子设计：光学性能与化学活性的协同优化

1. 荧光核心：绿色至黄绿色的光谱定位

AF532-NHS的荧光核心源于磺化罗丹明结构，其最大激发波长约为530 - 534 nm，最大发射波长约为553 - 555 nm，呈现明亮的绿色至黄绿色荧光。这一光谱特性使其与常见的532 nm激光器、绿色荧光通道高度匹配，能够高效激发并采集荧光信号。其摩尔消光系数高、荧光量子产率稳定，即使在低标记密度条件下，依然能够产生强烈荧光信号，显著提升检测灵敏度。相较于传统荧光素类染料（如FITC），AF532-NHS具有更强的抗光漂白能力和更好的光稳定性，适合长时间成像和多次激发实验。

2. 活性基团：NHS酯的高效偶联机制

NHS（N-羟基琥珀酰亚胺）酯基团是AF532-NHS实现分子标记的“化学钥匙”。在pH 7.2 - 8.5的缓冲体系中，NHS酯可与生物分子（如蛋白质、多肽）或材料表面（如氨基修饰的纳米颗粒、聚合物）的伯氨基（-NH₂）发生高效酰胺化反应，形成稳定的共价键。该反应无需额外催化剂，副反应少，偶联效率高，是生物偶联化学中最成熟、最可靠的方法之一。其短链烷基连接臂设计减少了空间位阻，确保反应活性，同时提升了分子的水溶性，避免了传统染料因疏水性导致的聚集问题。

技术优势：效率、稳定性与灵活性的“三重保障”

1. 反应高效性

NHS酯基团在室温或4℃下即可与伯胺快速反应，通常在数小时内完成标记，避免了长时间反应对生物分子活性的潜在影响。例如，在蛋白质标记中，AF532-NHS与抗体、酶或载体蛋白的偶联反应可在37℃孵育1小时内完成，且对生物分子活性影响极小，活性保留率通常高于90%。

2. 光谱兼容性

AF532-NHS的发射光谱与蓝色荧光染料（如DAPI、Hoechst）以及红色荧光染料（如AF647、Cy5）的光谱重叠度较低，可作为多色荧光标记方案中的一个通道使用，适用于需要同时检测多个目标物的实验设计。在共聚焦显微成像中，AF532标记的微管蛋白可清晰呈现细胞骨架的精细结构，其信噪比达到FITC标记的3倍水平。

三、产品形式：

外观：固体/粉末

纯度：95%，详情可在线咨询

发货：每日订单截止时间为16点整。

注意事项：本品应密封避光，储存于阴凉，干燥，通风处。

四、同类型相关试：

AF350-NHS

AF405-NHS

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Cy5-NHS

TAMRA-NHS

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