试剂 | 基础知识概述（部分）:

中文名称：5‘ 磷酸化亚磷酰胺 II

英文名称：5＇ Phosphorylating Amidite II (O-DMT-2,2-di(ethoxycarbonyl)propan-1,3-diol)

CAS：171285-25-9

分子式：C39H51N2O9P

分子量：722.80

试剂 | 结构式：

试剂 | 反应机理（部分）:

5＇ Phosphorylating Amidite II 是一种用于在固相DNA合成仪上，直接在寡核苷酸链的5＇末端引入一个磷酸基团 的用化学试剂。5＇ Phosphate Amidite (O-DMT-2,2＇-sulfonyldiethanol) 是一种用于寡核苷酸合成的亚磷酰胺试剂，其化学名称为 2-[2-(4,4＇-二甲氧基三苯甲氧基)乙基磺酰基]乙基-(2-氰乙基)-(N,N-二异丙基)-亚磷酰胺，主要用于在DNA或RNA链的5＇末端引入磷酸化修饰。

在寡核苷酸链的5＇末端引入磷酸基团，形成“磷酸帽”结构。该试剂通过固相合成技术与生长中的寡核苷酸链耦合，其活性磷中心与核苷酸的5＇羟基反应形成磷酸酯键，从而将磷酸基团引入链末端。将5＇ Phosphorylating Amidite II溶解于适量无水乙腈等有机溶剂中，通过合成仪注入反应柱，在活化剂（如四唑类化合物）作用下，与寡核苷酸链的5＇-羟基发生缩合反应，形成亚磷酸三酯中间体。

磷酸化后的寡核苷酸具备多重功能：连接与环化：5＇磷酸基团可与3＇羟基通过T4 DNA连接酶形成磷酸二酯键，用于构建环形探针或基因载体。酶切位点引入：磷酸化末端是限制性内切酶（如EcoRI、BamHI）的识别位点，支持精准基因编辑。信号放大：在分子信标（Molecular Beacon）中，5＇磷酸化可增强荧光淬灭效率，提升检测灵敏度。

试剂 | 细节注意（部分）:

1.固体/粉末

2.溶于大部分有机溶剂，溶于水

3.纯度标准95%+

4.保存建议：需要存储在-20°C，避光，避湿的环境，避免反复冻融。从冰箱取出产品后,置于室温回温至少30min-1h，再开盖，以避免受潮。

5.注意事项：仅用于科学研究，不作为其它用途。

试剂 | 相关试剂（部分）:

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（文章资料汇总来源于：陕西新研博美生物科技小编木木）