一、名称:
中文名称:Perfect 2000 DNA 梯度,2000bp DNA分子量标准
英文名称:Perfect 2000 DNA Ladder,Perfect 2K DNA Ladder
二、Reaction characteristics:
Perfect 2000 DNA Ladder 是一种高精度、预染色的分子量标记物,用于 DNA 电泳实验中分子量估算、片段大小分析及质量控制。该 DNA Ladder 通常由 一系列已知长度的双链 DNA 片段 组成,范围覆盖从几十至约 2000 碱基对(bp),可适用于琼脂糖凝胶电泳和聚丙烯酰胺凝胶电泳。
在琼脂糖凝胶电泳中,DNA Ladder的条带迁移率与片段长度成反比,通过比对未知DNA样本的迁移位置,可快速估算其分子大小。条带的清晰度和分离度可用于评估电泳条件(如凝胶浓度、电压)是否合适,确保实验结果可靠。某些条带(如高浓度亮带)还可用于半定量分析,通过亮度对比粗略估计样本DNA的浓度。
为确保实验结果的准确性,使用Perfect 2000 DNA Ladder需遵循以下规范:
解冻与混匀
从-20℃冰箱取出后,轻微离心使管壁液体沉底,室温解冻后充分混匀。避免反复冻融(建议分装保存),以防核酸酶污染导致条带降解。
凝胶制备与电泳条件
凝胶浓度:推荐使用1%琼脂糖凝胶(1000-2000 bp片段分离效果佳),若需分析更小片段(如100-500 bp),可提高至1.5-2%浓度。
电泳缓冲液:选用1×TAE或0.5-1×TBE,电压控制在4-10 V/cm(如10 cm胶长使用50-80 V电压),电泳时间20-40分钟,直至溴酚蓝指示剂迁移至凝胶长度2/3处。
上样量与成像
上样量:每孔加载5 μL(可根据凝胶孔大小调整至4-8 μL),确保条带亮度适中。
染色与成像:电泳结束后,使用EB、GelRed或SYBR Green等核酸染料染色,在紫外灯下观察并拍照。若需半定量分析,可通过比较样品条带与Ladder中已知浓度条带(如750 bp增强带)的亮度,粗略估算DNA含量。
(上述信息均由陕西新研博美生物科技小编木木所整理)

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