陕西新研博美生物有限公司实验室提供的Sulfo-NHS-SS-biotin是一种胺反应性的生物素化试剂。Sulfo-NHS-SS-biotin含有带负电荷的磺酸基，使其分子内产生足够的性，可以直接加入到反应性水溶液中，而不需要提溶解在有机溶剂中。尽管不需要提溶解，sulfo-NHS-SS-biotin的水溶性原液必须快速制备并立即使用，以防止活性酯的水解。Sulfo-NHS-SS-biotin与含胺的蛋白或其它分子反应形成一个复合体，该复合体进一步与亲和素或链霉素探针相互作用，用亲和层析的方法纯化目标分子。

化学属性

出品商：陕西新研博美生物科技有限公司

试验操作：

生物素化方法:

样品：468/EV 细胞和468/uPAR 细胞

溶解方法：可以溶于水中，为了获得更高的浓度，可以将离心管在37℃加热10分钟和/或在超声波浴中震荡一段时间。

反应条件：1 mg/ml, 冰上15分钟

应 用：细胞悬液(1.5×106)用预冷的PBS洗三次后与1mg/mL sulfo-NHS-SS-biotin混合，在冰上放置15分钟。用含100 mmol/L谷氨酸的PBS能够终止生物素化反应。细胞经过PBS清洗后，用含蛋白酶抑制剂的RIPAh缓冲液（20 mmol/L sodium phosphate, 150 mmol/L NaCl (pH 7.4), 1% NP40, 0.1% SDS, ａnd 0.5% deoxycholic acid）重悬。生物素化的膜蛋白用链霉亲和素琼脂糖拉下来，用SDS样品缓冲液洗脱出来，经过SDS-PAGE,电转到PVDF膜上, 后用抗体进行杂交。

其他二硫键材料：

NHS-SS-NHS

N3-SS-N3

Mal-SS-NHS

DBCO-SS-COOH

DBCO-SS-NH2

DBCO-SS-Biotin

DBCO-SS-NHS

DBCO-SS-Mal

Biotin-SS-azide

Biotin-SS-Sulfo-NHS

Mal-SS-NH2

mPEG-SS-NH2

mPEG-SS-PMMA

mPEG-SS-PEI

NH2-SS-NH2