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技术文章

AF405-莲花四叶草凝集素,AF 405 LTL,可支持长时间连续扫描成像

点击次数:7 发布时间:2026/10/20 9:52:12

产品介绍

AF 405 LTL是将从莲花四叶草种子中天然提取的Lotus Tetragonolobus凝集素(LTL),与Alexa Fluor 405蓝通道荧光染料通过温和的NHS酯共价偶联工艺制备而成的糖链特异性荧光标记科研试剂。它完整保留了莲花四叶草凝集素对α-L-岩藻糖残基的高亲和力识别特性,尤其对Fucα1-2Galβ1-4GlcNAc序列具有高选择性,同时引入Alexa Fluor 405染料的水溶性与低非特异性吸附特性,全程严格控制偶联反应的染料-蛋白摩尔比,通过多步凝胶过滤层析去除未反应的游离染料,解决了早期405 nm激发凝集素探针易团聚、背景信号偏高的痛点。试剂以黄色至浅绿色冻干粉末形式提供,在中性生理缓冲液中溶解分散性良好,是多色成像实验中405 nm蓝通道下岩藻糖基化糖链示踪的高可靠性主流工具。

基础参数

中文名称:AF405标记莲花四叶草凝集素,AF405-莲花四叶草凝集素

英文名称:AF 405 LTL,Alexa Fluor405-LTL,Alexa Fluor405-Lotus Tetragonolobus Lectin

外观状态:黄色至浅绿色冻干粉末

荧光光谱参数:激发波长约405 nm,发射波长约428 nm

储存条件:-20℃避光密封干燥保存,避免反复冻融,复溶后4℃环境下可短期放置1周,操作过程中全程严格避光,405 nm以上蓝光长时间照射易引发荧光淬灭,需用棕色管或铝箔包裹容器避光

用途:α-L-岩藻糖糖链405 nm通道荧光标记,多色成像蓝通道独立糖示踪,凝集素芯片构建与糖基化谱分析

作用机理

AF 405 LTL中的莲花四叶草凝集素蛋白以天然活性四聚体形式存在,每个亚基都保留完整的糖结合口袋,可高亲和力结合样本中分布在细胞表面、糖蛋白上的α-L-岩藻糖残基,对特定连接方式的岩藻糖基化糖链具有极强的选择性。Alexa Fluor 405荧光基团通过酰胺键偶联至凝集素活性位点外侧的赖氨酸残基上,标记过程完全不阻断糖结合口袋结构,也不会改变凝集素的天然构象。在405 nm激光激发下,偶联在蛋白上的AF 405基团可发射出明亮的428 nm蓝绿色荧光,该波段完全避开生物样本内源性自发荧光集中区域,直接将凝集素的糖链识别信号转化为低背景的蓝通道荧光信号,无需复杂二次标记操作,一步孵育即可完成靶标岩藻糖糖链的原位标记。

核心产品优势

AF 405 LTL的核心差异化优势集中在405 nm通道的超高通用性与低背景表现上,相比传统405 nm激发的凝集素探针,Alexa Fluor 405染料带有磺酸基修饰,水溶性大幅提升,偶联后探针几乎不发生非特异性疏水吸附,相同工作浓度下背景信号远低于普通市售同类型产品。试剂经过严格的游离染料去除工艺,游离染料残留低于2%,标记后凝集素的糖结合活性保留率可达90%以上,同时其光谱参数完全适配几乎所有共聚焦显微镜、流式细胞仪的405 nm标准检测通道,无需调整设备参数即可直接投入使用,是蓝通道下开展岩藻糖基化研究的主流成熟工具。

应用领域

AF 405 LTL可用于细胞表面岩藻糖基化荧光标记,依托405 nm蓝通道的低背景特性,在固定细胞样本中获得高信噪比的糖链成像结果,清晰呈现样本中岩藻糖修饰糖蛋白的精细分布模式。该试剂可应用于凝集素芯片构建,将其作为标准荧光探针用于芯片上固定糖链的特异性识别检测,实现高通量糖表型筛选。同时它也适用于多色实验蓝通道独立糖示踪,与AF 488、AF 555、AF 647等不同波段的荧光探针搭配使用,轻松实现四色及以上的多通道共定位分析,直观展示岩藻糖糖链与多个靶标蛋白的空间分布关系,为糖生物学常规研究提供稳定可靠的主流工具。(本篇图文信息均由陕西新研博美生物科技小编木木提供,仅用于科研)

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原创作者:陕西新研博美生物科技有限公司

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