磁珠法核酸提取都分为哪几个步骤？_操作维修_技术文章

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磁珠法核酸提取都分为哪几个步骤？

点击次数：3575 发布时间：2023/8/22 10:26:31

核酸作为一切分子生物学研究的基础，其提取通常是开启生物学研究，而且提取的核酸质量高低也是决定下游实验成败的关键因素之一。常见的核酸提取方法有酚抽提法、高盐沉淀法、柱式法和磁珠法，其中，磁珠法核酸提取都分为哪几个步骤？让我们一起来看看吧！
第yi步：裂解

核酸必须从细胞或其他生物物质中释放出来，细胞裂解可通过机械作用、化学作用、酶作用等方法实现。其中，酶作用主要是通过加入溶菌酶或蛋白酶（蛋白酶K、植物蛋白酶或链霉蛋白酶）以使细胞破裂，核酸释放。蛋白酶还能降解与核酸结合的蛋白质，促进核酸的分离。

第二步：结合

磁珠表面带负电荷，磁珠buffer是高盐环境有带正电荷的盐离子，样本被buffer影响，磷酸基团带负电荷。

第三步：洗涤

核酸的高电荷磷酸骨架使其比蛋白质、多糖、脂肪等其他生物大分子物质更具亲水性，根据它们理化性质的差异，用选择性沉淀、层析、密度梯度离心等方法可将核酸分离、纯化。

用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中chang用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理性的沉淀剂。当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，使DNA失水而易于聚合。

第四步：洗脱

加水或者EB破坏高盐环境，形成低盐环境，使DNA从磁珠上脱落。

注：文章来源于网络，如有侵权，请联系删除

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