甲基乙二醛(MG)含量

甲基乙二醛（MG）含量试剂盒说明书

（分光法 48 样）

一、产品简介：

甲基乙二醛（methylglyoxal, MG），又称丙酮醛，是几种代谢途径产生的副产物，也是植物受到环境胁迫时产生的一种常见的有毒醛类化合物。高浓度的 MG 是一种细胞毒素，而低浓度的 MG 作为一种信号分子，调节细胞代谢、种子萌发、植物生长、发育、生殖等多种生理过程和耐逆性形成的获得，故 MG 具有双重作用。

甲基乙二醛（MG）和 1,2-邻苯二胺反应生成的产物在 336nm 下有最大吸收峰, 通过检

测该产物在 336nm 的值进而计算得出样本中甲基乙二醛（MG）含量。

二、测试盒组成和配制：

三、所需的仪器和用品：

紫外分光光度计、1mL 石英比色皿（光径 1cm）、可调式移液器、研钵、蒸馏水。

四、甲基乙二醛（MG）含量检测：

建议正式实验前选取 2 个样本做预测定，了解本批样品情况，熟悉实验流程，避免实验样本和试剂浪费！

1、样本制备：① 组织样本：

称取 0.1g 样本，先加入 1mL 的提取液，冰浴匀浆，12000rpm，4℃离心 10min，取上

清液转移至新的 EP 管中，12000rpm，4℃再次离心 10min，取全部上清液待测。【注】：若增加样本量，可按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为 1：5~10 的比例进行提取

② 液体样本：

澄清的液体样本直接检测，若浑浊则需 12000rpm，室温离心 10min，取上清液备用。

③ 细菌/细胞样本：

先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；取约 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液，超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率 200W，超声 3s，间隔 10s，重复 30 次）；12000rpm 4℃离心 10min，取上清，置冰上待测。

【注】：若增加样本量，可按照细菌/细胞数量（104）：提取液（mL）为 500~1000：1 的比例进行提取。

2、上机检测：

① 紫外分光光度计预热 20min 以上，调节波长至 336nm，蒸馏水调零。② 在 EP 管中依次加入下列试剂：

光值。ΔA=A 测定管-A 对照（每个样本做一个自

身对照）。

【注】：1. 若 A 测定值大于 2，样本可用蒸馏水稀释，稀释倍数 D 代入计算公式计算。

2. 若ΔA 在零附近，可增加样本取样质量 W（如增加至 0.2g），或增加样本加样量 V1（如

增至 120µL，则试剂一相应减少），则改变后的 W 和 V1 代入计算公式计算。

五、结果计算：

1、 标准曲线方程为 y =0.7098x-0.003；x 为标准品浓度（µmol/mL），y 为吸光值ΔA。

2、按样本重量计算：

甲基乙二醛(MG)含量(µmol/g 重量)=[(ΔA+0.003)÷0.7098×V1]÷(W×V1÷V)×D

=1.41×(ΔA+0.003)÷W×D

3、按液体体积计算：

甲基乙二醛(MG)含量(µmol/mL)=(ΔA+0.003)÷0.7098×D=1.41×(ΔA+0.003)×D

4、按细胞数量计算：

甲基乙二醛(MG)含量(µmol/104 cell)=[(ΔA+0.003)÷0.7098×V1]÷(500×V1÷V)×D

=1.41×(ΔA+0.003)÷500×D

V---样品提取液总体积，1mL；V1---测定时所取样本的体积，0.08mL；

W---样本质量，g；500---细胞数量，万；

D---自行稀释倍数，未稀释即为 1。

附：标准曲线制作过程：

1制备标准品母液（15µmol/mL）：

2把母液用提取液稀释成六个浓度梯度的标准品：0, 0.4, 0.8, 1.2, 1.6, 2. µmol/mL。也

可根据实际样本来调整标准品浓度。

3依据测定管的加样表操作，根据结果即可制作标准曲线。