高密度无支架培养的 3D 细胞球高通量筛选应用于肿瘤毒性研究
发布时间:2021/7/27 16:45:19关注度:3086
与传统的 2D 培养模型相比,3D 球体模型能够更好地模拟肿瘤的体内组织结构、基因表达和代谢情况,因此癌症研究的 3D 球体模型越来越受欢迎 。先的研究表明,3D 培养显示出多种体内肿瘤特征,如细胞 - 细胞 /ECM 相互作用、药物外显率、剂量反应和耐药性。与实体瘤相似,球状体由外部细胞增殖区、中层静止细胞和内部坏死核心组成,这些坏死核心细胞暴露在缺氧条件
下。这些相似之处表明,3D 模型将有助于更好地评估药物安全性,并有助于成功识别抗肿瘤化合物。
针对 3D 细胞球培养,已经开发了各种各样的技术。原则上,这些方法使用细胞附着抵抗表面或物理力量来促进细胞与细胞的相互作用。旋转培养瓶 /NASA 生物反应器系统使用连续运动来防止细胞粘附在培养瓶表面,从而促进细胞与细胞之间的粘附。磁悬浮法利用磁场将含有纳米颗粒的氧化铁细胞团簇在一起形成球状体。而旋瓶法和磁悬浮法会产生大量的球状体,均匀性差,球状体比例低。悬滴法是将细胞悬浮液滴在培养皿的底部。然后将这些液滴中形成的球状体转移到细胞培养板中进行进一步的检测。
优势
•便于增加每个实验条件下的细胞球数量
•大量的细胞球可同时培养、染色和成像
•使用高内涵成像,同时对多个细胞球或类器官进行3D 分析
在没有自动化条件下,这项技术是劳动密集型且时间消耗大,因此限制了它只能在小范围内被研究和应用。目,一种流行的产生细胞球的方法是使用镀有低附着材料的 u 形底孔的板。这种无支架的方法提供了一个相对简单的工作流程,并与高内涵成像兼容。此外,细胞球尺寸易于控制,球体的均匀度高 2。以的工作是用一步染色法优化圆形底板的工作流程,这样可以减少分析时间并使变量小化 3。然而,使用 u 型底板的一个缺点是,在每个孔中只能生成一个单一的细胞球。为了增加数据点,需要重复的孔,这是一项耗时的工作,终会增加试剂和测试化合物的使用量,从而提高筛选成本。
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原创作者:美谷分子仪器(上海)有限公司