躁郁症（BD）是种高度遗传性的心理疾病，它影响到全球大概 1%的人口。1949 年锂被第次应用于躁郁症，到目为止锂仍是治疗 BD 的主要药物。然而在半的病例中，锂并不能起到很好的治疗效果，同时此药的毒性和副作用也值得关注。

目为止人们对于锂的治疗机制还未完全了解，已知锂会阻断糖原合成酶激酶 3 (GSK-3)的活性并激活 Wnt 信号通路，后者直接或者间接地减少蛋白酶对ß-catenin 的降解。我们可以利用 Wnt/ß-catenin 信号通路中新的蛋白以及药理学调节分子对ß-catenin 的阻断作用来鉴别这些蛋白，这种方法是通过检测残留在细胞中的ß-catenin 量来达到的。可以通过高效系统的成像技术使这种定量技术变得简单，从而进步提高检测和分析的质量。

为了有助于这研究，利用 Molecular Devices 公司的高内涵成像系统基于细胞水平的检测技术，我们已经建立了包含 1856 种新蛋白的库，这使我们能准确的通过 wnt 信号通路的影响程度来检测细胞核中ß-catenin 的量。

终点法高通量实验流程

U2OS 细胞可以表达融合了绿色荧光蛋白（EGFP）的人源ß-catenin，我们在 384 孔板中每孔加入 1500 个细胞。细胞 37 度培养 48 小时后，加入库中筛选的蛋白。细胞继续培养 24h然后用含 5µg/mL Hoechst 33342 DNA 染料的 4%多聚甲醛进行固定染核。在此基础上，我们对库中的活性蛋白进行了进步的筛选，结果后面会显示。

原创作者：美谷分子仪器（上海）有限公司