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美谷分子仪器(上海)有限公司

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高内涵成像技术在单抗结合检测中的应用

发布时间:2021/4/12 14:18:36关注度:3001

单抗结合检测方法的发展大大提高了细胞及免疫磁珠的高通量, 高内涵分析效率。这种不用冲洗, 基于荧光微孔分析技术(fluorometric microvolume assay technology, FMAT) 的方法可以快速的针对更少量的细胞进行筛选,而且在传统样本检测中由于多次洗板造成的细胞损失也完全可以避免。

抗体的发现在诊断疾病,研发疫苗和治疗疾病的过程中起到重要作用。 研究者们利用杂交瘤细胞或者形成克隆来筛选高表达克隆株,检测细胞表面的抗体结合效率,观测抗体或配体在细胞内的内化。在传统的
FMAT 检测方法的已有优点之上,利用 ImageXpress® Micro 宽场高内涵分析系统进行操作的单抗结合检测方法可以让科学家们在同个平板孔中检测多种不同细胞的表面抗体结合情况。这系统也可以将检测规模提升到 1536 孔板,并且只需要 2-3 微升的样本。即使用更低的二抗浓度,其检测范围和灵敏度也不会下降, 甚至有所提高。


检测原理
抗体被富集在磁珠上并用带荧光的二抗进行标记。荧光成像技术可以检测被磁珠捕获的抗体数量。利用类似的方法同样可以检测细胞表面结合的配体以及配体和抗体的内化。在单抗结合检测过程中(图 1),应将贴壁细胞,悬浮细胞或抗体包被磁珠样本加入到96,384,1536 孔板中。然后加入抗(目标抗体), 接着用二抗对抗进行标记来检测抗的结合情况。

原创作者:美谷分子仪器(上海)有限公司




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