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小鼠γ-谷氨酰转移酶(GGT)ELISA试剂盒学姐推荐的#试剂采购#
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小鼠γ-谷氨酰转移酶(GGT)ELISA试剂盒学姐推荐的#试剂采购#




产品简介及优势
本 ELISA 检测试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫分析法,可检测样本中目标蛋白含量。操作简便、特异性强、灵敏度高,批间与批内变异小,结果稳定可靠。试剂盒配套完整试剂,适用于血清、血浆、细胞上清、组织匀浆等多种生物样本,广泛应用于基础科研、机制研究、样本筛查等实验场景,全程遵循标准化实验流程,助力高效获取定量检测数据。
基础信息
规格:48T/96T两种可拆卸规格,孔位可分次使用,节约实验成本。
检测波长450nm
单孔加样量100µL
样本回收率稳定在合理区间,检测误差小。
储存条件:2–8℃避光密封保存
保质期:6个月
核心检测原理
用纯化的抗体包被微孔板,制成固相载体,往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素,经过洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色并在酸的作用下转化成z终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450NM波长下测定吸光度 (0D值),计算样品浓度。
样本收集与规范处理方法
1、血清样本(最常用)
采集静脉全血置于无抗凝采血管,室温静置2h或4℃静置过夜自然凝固分层;4℃、3000r/min离心15-20min,轻柔吸取上层清亮淡黄色血清,避免吸取血细胞造成溶血;短期检测可4℃冷藏保存,长期需分装后-20℃冻存,严格避免反复冻融(冻融次数≤2次)。
2、血浆样本
采用EDTA、肝素抗凝采血管采血,采血后立即轻柔颠倒混匀防止凝血;30min内4℃、3000r/min离心15min,分离上层清亮血浆备用;避免抗凝剂浓度过高,防止干扰酶促显色反应。
3、细胞培养上清
收集培养结束后的细胞培养液,3000r/min离心10min,去除细胞碎片、沉淀杂质;取澄清上清可直接上机检测,短期4℃存放,长期分装-20℃密封冻存。
试剂盒组成
名称 96孔配置 48孔配置 备注
微孔酶标板 12孔×8条 12孔×4条 无
标准品 0.3mL*6管 0.3mL*6管 无
样本稀释液 6mL 3mL 无
检测抗体-HRP 10mL 5mL 无
20×洗涤缓冲液 25mL 15mL 按说明书进行稀释
底物A 6mL 3mL 无
底物B 6mL 3mL 无
终止液 6mL 3mL 无
封板膜 2张 2张 无
说明书 1份 1份 无
自封袋 1个 1个 无
实验步骤
使用前将所有试剂置于室温平衡30分钟左右,也可置于37℃温箱快速回温至室温。
注意:酶标板未恢复室温前,请勿开封。
1 编号 检测试验需设置校准品孔、样品孔、空白孔,合理规划各样本的排布。
2 稀释
加样 准品孔:每孔加入校准品100uL,(S1-S7,共7个浓度)。
样品孔:每孔加入1×通用稀释液50uL,再加入样本50uL。
空白孔:每孔加入(S0)1×通用稀释液100uL。
3 温育 盖上封板膜,在37℃下孵育60分钟
4 洗板 洗板3次,一次洗板后倒扣酶标板,在干净的吸水纸上拍去残液。
5 加酶 校准品孔/样品孔:每孔加入100µL 的1×酶标记物工作液。
空白孔:什么也不加。
6 温育 盖上封板膜,在37℃下孵育60分钟。
7 洗板 洗板5次,一次洗板后倒扣酶标板,在干净的吸水纸上拍去残液。
8 显色 每孔加入显色剂100uL,37℃避光显色15分钟。
9 终止 每孔加终止液 50uL。
10 测定 使用酶标仪在450nm检测波长测定吸光度值(单波长);
或者,使用酶标仪在450/630nm检测波长测定吸光度值(双波长)。
* 应当进行预实验确定最佳稀释倍数。
结果计算
双波长检测结果无需进行调0,可直接进行标曲拟合及结果计算。
以下曲线拟合方式均可使用,选择拟合后r值最佳的拟合方式进行结果计算。
四参数逻辑(4-P)曲线拟合:以浓度值为横坐标,吸光度值为纵坐标;
多项式曲线拟合:2次多项式、3次多项式;
双对数直线拟合:以浓度值取对数,吸光度值取对数后,进行直线拟合;
点对点拟合:各相邻点之间分别单独进行线性拟合,分段计算;
推荐使用专业化软件进行结果拟合和计算,如ELISACALC、SPSS、Graphpad Prism等。
**样本浓度应乘上样本的稀释倍数。
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