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斑马鱼还原型辅酶I(NADH)ELISA试剂盒的价格怎么样？#科研新闻#
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品牌名称：瑞番型号：原产地：中国大陆 更新时间：2026/10/12 10:48:45
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详细内容
斑马鱼还原型辅酶I(NADH)ELISA试剂盒的价格怎么样？#科研新闻#
产品简介及优势
本ELISA 检测试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫分析法，可检测样本中目标蛋白含量。操作简便、特异性强、灵敏度高，批间与批内变异小，结果稳定可靠。试剂盒配套完整试剂，适用于血清、血浆、细胞上清、组织匀浆等多种生物样本，广泛应用于基础科研、机制研究、样本筛查等实验场景，全程遵循标准化实验流程，助力高效获取定量检测数据。
基础信息
规格：48T/96T两种可拆卸规格，孔位可分次使用，节约实验成本。
检测波长450nm
单孔加样量100µL
样本回收率稳定在合理区间，检测误差小。
储存条件：2–8℃避光密封保存
保质期：6个月
核心检测原理
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相载体，往包被抗该指标抗体的微孔中依次加入标本或标准品、生物素化的抗该指标抗体、HRP标记的亲和素，经过洗涤后用底物TMB显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色并在酸的作用下转化成z终的黄色。颜色的深浅和样品中的该指标呈正相关。用酶标仪在450NM波长下测定吸光度(0D值)，计算样品浓度。
样本收集与规范处理方法
1、血清样本（最常用）
采集静脉全血置于无抗凝采血管，室温静置2h或4℃静置过夜自然凝固分层；4℃、3000r/min离心15-20min，轻柔吸取上层清亮淡黄色血清，避免吸取血细胞造成溶血；短期检测可4℃冷藏保存，长期需分装后-20℃冻存，严格避免反复冻融（冻融次数≤2次）。
2、血浆样本
采用EDTA、肝素抗凝采血管采血，采血后立即轻柔颠倒混匀防止凝血；30min内4℃、3000r/min离心15min，分离上层清亮血浆备用；避免抗凝剂浓度过高，防止干扰酶促显色反应。
3、细胞培养上清
收集培养结束后的细胞培养液，3000r/min离心10min，去除细胞碎片、沉淀杂质；取澄清上清可直接上机检测，短期4℃存放，长期分装-20℃密封冻存。
试剂盒组成
名称 | 96孔配置 | 48孔配置 | 备注 |
微孔酶标板 | 12孔×8条 | 12孔×4条 | 无 |
标准品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 | 无 |
样本稀释液 | 6mL | 3mL | 无 |
检测抗体-HRP | 10mL | 5mL | 无 |
20×洗涤缓冲液 | 25mL | 15mL | 按说明书进行稀释 |
底物A | 6mL | 3mL | 无 |
底物B | 6mL | 3mL | 无 |
终止液 | 6mL | 3mL | 无 |
封板膜 | 2张 | 2张 | 无 |
说明书 | 1份 | 1份 | 无 |
自封袋 | 1个 | 1个 | 无 |
实验步骤
使用前将所有试剂置于室温平衡30分钟左右，也可置于37℃温箱快速回温至室温。
注意：酶标板未恢复室温前，请勿开封。
1 | 编号 | 检测试验需设置校准品孔、样品孔、空白孔，合理规划各样本的排布。 |
2 | 稀释 加样 | 准品孔：每孔加入校准品100uL，（S1-S7，共7个浓度）。 样品孔：每孔加入1×通用稀释液50uL，再加入样本50uL。 空白孔：每孔加入（S0）1×通用稀释液100uL。 |
3 | 温育 | 盖上封板膜，在37℃下孵育60分钟 |
4 | 洗板 | 洗板3次，一次洗板后倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍去残液。 |
5 | 加酶 | 校准品孔/样品孔：每孔加入100µL的1×酶标记物工作液。 空白孔：什么也不加。 |
6 | 温育 | 盖上封板膜，在37℃下孵育60分钟。 |
7 | 洗板 | 洗板5次，一次洗板后倒扣酶标板，在干净的吸水纸上拍去残液。 |
8 | 显色 | 每孔加入显色剂100uL，37℃避光显色15分钟。 |
9 | 终止 | 每孔加终止液50uL。 |
10 | 测定 | 使用酶标仪在450nm检测波长测定吸光度值（单波长）； 或者，使用酶标仪在450/630nm检测波长测定吸光度值（双波长）。 |
*应当进行预实验确定最佳稀释倍数。
结果计算
双波长检测结果无需进行调0，可直接进行标曲拟合及结果计算。
以下曲线拟合方式均可使用，选择拟合后r值最佳的拟合方式进行结果计算。
四参数逻辑（4-P）曲线拟合：以浓度值为横坐标，吸光度值为纵坐标；
多项式曲线拟合：2次多项式、3次多项式；
双对数直线拟合：以浓度值取对数，吸光度值取对数后，进行直线拟合；
点对点拟合：各相邻点之间分别单独进行线性拟合，分段计算；
推荐使用专业化软件进行结果拟合和计算，如ELISACALC、SPSS、Graphpad Prism等。
**样本浓度应乘上样本的稀释倍数。
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