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BUNSEN本生小课堂：96孔PCR板与封板膜的正确步骤有哪些
点击次数：110发布时间：2026/8/13 13:29:45
BUNSEN本生小课堂：96孔PCR板与封板膜的正确步骤有哪些
BUNSEN本生结合荧光定量PCR耗材、移液器操作等相关实验应用，96孔PCR板与封板膜的正确操作是保障qPCR实验无蒸发、无交叉污染、荧光信号稳定的关键环节，具体步骤如下：
一、操作前准备
耗材核验：确认96孔PCR板无DNase/RNase污染，适配所用qPCR仪热模块尺寸，提前准备对应规格的光学封板膜。
体系检查：使用校准合格的移液器完成各孔反应液加样，确认每孔液面高度一致，无气泡、无挂壁残留。
环境准备：操作台面清洁无核酸残留，准备好封板刮板、吸水纸等辅助工具，避免后续操作引入外源污染。
二、96孔PCR板铺膜操作
撕开封板膜外包装，手持膜的边缘部分，避免手指触碰中间光学区域，防止留下指纹影响荧光透光性。
将封板膜平整覆盖在96孔板的整个上表面，对齐板体边缘，确保所有孔位完全被膜覆盖，无孔位裸露。
从板的一端向另一端，用专用刮板沿孔间缝隙反复均匀刮压3——5次，重点刮压每个孔的四周边缘，保证每孔完全密封无空隙。
刮压完成后，肉眼逐孔检查，确认所有孔口边缘无翘边、无褶皱，膜与板体完全贴合，无局部漏液缝隙。
三、上机前确认操作
轻晃96孔板，观察各孔液面无移动、无漏液情况，确认密封有效性。
用干净无尘纸轻轻擦拭板底残留的手印、水渍，避免遮挡底部荧光信号采集路径。
确认板体完全适配qPCR仪的热模块，平稳放入仪器中，关闭仪器舱门后启动扩增程序。
四、关键注意事项
禁止使用普通透明胶带替代专用光学封板膜，会严重遮挡荧光信号，导致Ct值偏差大幅升高。
刮压力度要均匀，力度过大易戳破封板膜，力度不足会导致孔间液体蒸发，出现边缘孔数据异常。
热封型封板膜需使用对应热封仪，设置170℃、2——3秒的参数完成热封，避免温度过高融化板体。
| BS-PCR-96-01-T | 0.1ml 96孔PCR板-无裙边， 透明 |
| BS-PCR-96-01-W | 0.1ml 96孔PCR板-无裙边， 乳白色 |
| BS-PCR-96-02-B-T | 0.2ml 96孔PCR板-半裙边， 透明 |
| BS-PCR-96-02-T | 0.2ml 96孔PCR板-无裙边， 透明 |
| BS-PCR-384W | 40μl 384孔全裙边 PCR 板 乳白色 |
| BS-PCR-384T | 40μl 384孔全裙边 PCR 板 透明 |
| BS480-PCR-01-B | Roche 480专用PCR 96孔板,0.1ml,乳白色 |
| BS-PCR-M | 荧光定量 qPCR 封板膜,高透光度压敏封板膜 |
| BS-PCR-M-G | 荧光定量 qPCR 封板膜,高粘PCR封板膜 |
| BS-PCR-TG | 高透气封板膜142mm'83mm |
| BS-PCR-FL | 96孔非粘附穿刺膜，对标AF-PE-50 |
| BS-PCR-08-96 | 八连管封板膜用于8连管或可拆分96孔板 |
| BS-102301 | 0.1ml 96孔pcr板-半裙边，透明，无酶，无热源 (ABI专用) |
| BS-102201 | 0.1ml 96孔PCR板-半裙边，自色，无酶，无热源(罗氏480专用) |
| BS-202203 | 0.2ml薄壁96孔可拆卸无裙边PCR板+96联光学平盖 |
| BS230S4280L | Elisa封板膜 |
注：以上资料仅供参考，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。
本生BUNSEN科研耗材适应客户：医院检验科PCR实验室，中心实验室，肝病中心；第三方检测机构，科研院所，大专院校，制药厂，试剂生产厂家，疾控中心，检验检疫。
