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人白介素8(IL-8CXCL8)ELISA检测试剂盒技术说明书
点击次数： 429发布时间：2026/1/4 10:11:36
- 上 传 者： 本生（天津）健康科技有限公司
- 上传时间： 2026/1/4 10:11:36
- 文件大小： KB
- 文件类型： doc
- 所属分类： 应用方法
- 下载次数： 4次
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资料简介： 人白介素8(IL-8CXCL8)ELISA检测试剂盒技术说明书 BS-1551 人白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA试剂盒 一、产品信息 产品名称：人白介素8(IL-8/CXCL8)酶联免疫吸附测定试剂盒 规格：96孔板/48孔板(可选) 检测方法：双抗体夹心酶联免疫吸附法(ELISA) 检测范围：7.81-500 pg/mL(具体以实际产品说明为准) 灵敏度：≤4.69 pg/mL(具体以实际产品说明为准) 样本类型：血清、血浆、细胞培养上清液、细胞裂解液等生物样本 保质期：6个月(2-8℃避光保存，具体以产品标签为准) 用途：仅供科研使用，不可用于临床诊断或治疗 二、检测原理 本试剂盒采用双抗体夹心ELISA法。预先包被在酶标板孔中的抗人IL-8/CXCL8单克隆抗体捕获样本或标准品中的目标抗原。加入生物素标记的检测抗体后，形成“包被抗体-抗原-检测抗体”复合物。随后加入辣根过氧化物酶标记的亲和素，通过特异性结合完成信号放大。洗涤去除未结合成分后，加入TMB显色底物。辣根过氧化物酶催化底物反应，生成蓝色产物，加入终止液后变为黄色。颜色的深浅与样本中IL-8/CXCL8的浓度成正比，通过酶标仪在450nm波长处测定吸光度值，依据标准曲线计算样本浓度。 三、试剂盒组成 预包被抗体酶标板：96孔或48孔，含抗人IL-8/CXCL8单克隆抗体 标准品：冻干粉，复溶后形成系列浓度梯度 样本稀释液：用于稀释样本和标准品 生物素标记检测抗体：与目标抗原特异性结合 生物素标记抗体稀释液：用于稀释生物素标记检测抗体 辣根过氧化物酶标记亲和素：信号放大试剂 酶结合物稀释液：用于稀释辣根过氧化物酶标记亲和素 浓缩洗涤液：20×浓缩液，需用去离子水稀释 显色底物(TMB)：避光保存 终止液：含稀硫酸，具轻微腐蚀性 封板膜：用于温育时密封酶标板 说明书：详细操作指南 四、实验准备 1. 样本收集与处理 血清样本：全血室温静置2小时或4℃过夜，2000rpm离心20分钟，取上清。4℃保存1周内检测，长期保存需分装冻存于-20℃以下，避免反复冻融。 血浆样本：使用EDTA或肝素抗凝，处理方法同血清。 细胞培养上清：2000rpm离心20分钟去除细胞碎片，取上清检测。 样本稀释：若样本浓度超出检测范围，需用样本稀释液稀释后重新检测。 2. 试剂准备 浓缩洗涤液：用去离子水按1:20比例稀释，室温平衡后使用。 标准品：按说明书要求用标准品稀释液复溶，轻柔混匀避免气泡，形成系列浓度梯度。 生物素标记检测抗体：使用前用生物素标记抗体稀释液稀释。 辣根过氧化物酶标记亲和素：使用前用酶结合物稀释液稀释。 3. 自备器材 酶标仪(450nm波长) 微量移液器及吸头 洗板机或洗瓶 37℃恒温箱或水浴锅 去离子水 五、操作步骤 加样：从平衡至室温的铝箔袋中取出所需板条，设置标准品孔、样本孔和空白孔。标准品孔加入系列浓度标准品50μL，样本孔加入待测样本50μL，空白孔不加。 温育：除空白孔外，每孔加入100μL稀释后的生物素标记检测抗体，封板膜封住反应孔，37℃温育60分钟。 洗涤：弃去孔内液体，每孔加满洗涤液(350μL)，静置1分钟后甩去，重复洗涤3-5次，拍干。 加酶标物：每孔加入100μL稀释后的辣根过氧化物酶标记亲和素，封板膜封住，37℃温育30分钟。 洗涤：同步骤3。 显色：每孔加入90μL显色底物(TMB)，37℃避光显色15-30分钟。 终止：每孔加入50μL终止液，终止反应(蓝色变为黄色)。 检测：30分钟内用酶标仪在450nm波长处测定吸光度值(OD值)。 六、结果计算 以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标，绘制标准曲线。根据样本OD值，从标准曲线中计算样本浓度。若样本经稀释，结果需乘以稀释倍数。 七、注意事项 试剂平衡：所有试剂和样本使用前需平衡至室温(20-25℃)，避免温度差异影响结果。 试剂保存：未使用试剂需及时放回2-8℃保存，避免反复冻融浓缩洗涤液。 操作规范： 避免试剂和样本交叉污染。 洗板时确保孔内液体被充分吸干，但避免过度干燥。 显色底物需避光保存，使用前应为无色或浅色。 终止液具腐蚀性，避免接触皮肤和衣物。 质量控制： 每次实验设置空白孔和标准品孔。 板内、板间变异系数应小于10%。 回收率应在80%-120%之间。 样本处理：所有样本视为潜在传染源，操作时需佩戴防护装备，废弃物按生物安全规范处理。 八、产品性能 灵敏度：≤4.69 pg/mL(具体以实际产品说明为准)。 特异性：与IL-8类似物无交叉反应。 精密度：板内、板间变异系数均小于10%。 回收率：80%-120%。 线性范围：7.81-500 pg/mL(具体以实际产品说明为准)。 注：以上仅供参考，本产品仅供科研使用，不作为实际数据，实验需严格遵循说明或咨询技术老师。 天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标，本生，您信任的合作伙伴! 本生试剂盒
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