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人Ⅲ型原胶原N端前肽(PⅢNP)ELISA试剂盒实验使用说明书
点击次数： 23发布时间：2025/7/14 9:29:41
- 上 传 者： 本生（天津）健康科技有限公司
- 上传时间： 2025/7/14 9:29:41
- 文件大小： KB
- 文件类型： doc
- 所属分类： 应用方法
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资料简介： 人Ⅲ型原胶原N端前肽(PⅢNP)ELISA试剂盒使用说明书 BS-1708 人Ⅲ型原胶原N端前肽(PⅢNP)ELISA试剂盒 一、试剂盒简介 人Ⅲ型原胶原N端前肽(PⅢNP)ELISA试剂盒采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)原理，用于定量检测血清、血浆及相关液体样本中PⅢNP的含量。PⅢNP是III型胶原蛋白合成过程中产生的肽段，其血清水平可作为肝脏纤维化和肝硬化的指标。 二、试剂盒组成 试剂盒通常包含以下组分(具体以实际包装为准)： 酶标包被板：1×48孔或1×96孔(预包被捕获抗体) 标准品：通常为冻干粉或液体，浓度范围常见为62.5-4000pg/mL 样品稀释液：3ml×1瓶或6ml×1瓶 检测溶液A(生物素标记抗体)和检测溶液B(HRP标记物) TMB底物溶液和终止液 浓缩洗涤液(20-30倍) 封板膜和说明书 三、样本处理要求 血清样本：室温血液自然凝固10-20分钟后，2000-3000转/分离心20分钟，收集上清。避免溶血和反复冻融。 血浆样本：使用EDTA、柠檬酸钠或肝素抗凝，采集后30分钟内2-8℃离心(1000×g，15分钟)。 组织匀浆：按1:9重量体积比加入PBS匀浆，5000×g离心5-10分钟取上清。 细胞培养上清：直接1000×g离心20分钟收集。 注意：NaN3会抑制HRP活性，含NaN3的样品不能检测。 四、实验操作步骤 试剂准备： 使用前将所有试剂平衡至室温(18-25℃) 按需稀释浓缩洗涤液(如20ml浓缩液加580ml蒸馏水) 标准品梯度稀释(常见7-8个浓度点) 加样与孵育： 分别设空白孔、标准孔和样品孔 加入标准品或样品100μL/孔，37℃孵育30-90分钟 洗板5次(每次静置30秒)，拍干 检测抗体孵育： 加入生物素标记抗体100μL/孔，37℃孵育60分钟 再次洗板5次 显色与终止： 加入TMB底物90μL/孔，37℃避光显色15分钟 加入终止液50μL/孔，立即测定 结果读取： 使用酶标仪在450nm波长读取OD值 以标准品浓度为横坐标，OD值为纵坐标绘制标准曲线 通过标准曲线计算样品浓度 五、注意事项 操作规范： 不同批次试剂不可混用 避免底物接触金属器具 严格控温和时间，建议做双复孔 保存条件： 未开封试剂盒：部分组分-20℃保存，部分2-8℃保存(详见标签) 开封后：酶标板加干燥剂密封保存于-20℃，剩余试剂按标签温度保存 质量控制： 板内变异系数应<10%，板间变异系数<10% 回收率应在85%-115%范围内 安全事项： TMB底物有毒性，终止液有腐蚀性，需防护 避免直接接触试剂，操作时穿戴防护装备 六、技术参数 检测范围：常见62.5-4000pg/mL(不同品牌有差异) 灵敏度：检测限通常≤25pg/mL 精密度：批内CV≤10%，批间CV≤15% 有效期：一般为6-12个月(以包装标签为准) 天津本生一直视质量控制为企业的生命，追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承：遵纪守法，严于律己，宽仁以待，敢于承担的企业精神作为标准，以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场，较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢，是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作，共创美好的未来。
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