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本生(天津)健康科技有限公司 主营产品:PETG广口试剂瓶-0.1mlPCR单管-人双链RNA试剂盒-0.2ml透明八连管-特级胎牛血清-荧光定量PCR光学平盖-无裙边96孔PCR板-Roche480专用PCR96孔板-荧光定量PCR专用光学封板膜-Roche480专用辅助器-50ml离心管 无菌-15ml离心管 无菌-2ml冻存管自立-60ml无菌瓶-30ml自立试管无菌-45ml无菌超速离心管- 200ul带滤芯加长吸头-200ul黄色盒装吸头-1000ul带滤芯吸头-1000ul 蓝色,BASIX短吸嘴-96孔深孔板-500ml培养瓶-96孔可拆酶标板-96孔ELISA平底无盖组织培养板-细胞培养血清-进口天然乳胶/丁腈手套

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资料下载

大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒实验使用说明书

点击次数: 21发布时间:2025/7/10 9:27:49

  • 上 传 者: 本生(天津)健康科技有限公司
  • 上传时间: 2025/7/10 9:27:49
  • 文件大小: KB
  • 文件类型: doc
  • 所属分类: 应用方法
  • 下载次数: 0次
  • 查看次数: 21

资料简介:

  大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒实验使用说明书

  BS-2889大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒

  一、试剂盒组成与保存条件

  大鼠转化生长因子β2(TGFβ2)ELISA试剂盒通常包含以下主要组分:

  预包被微孔板(8×12 strips或8×6)

  TGF-β2标准品(冻干粉,通常浓度为10,000pg/mL)

  生物素标记的检测抗体(120μL/70μL)

  HRP标记链霉亲和素(120μL/70μL)

  TMB显色液(10mL/6mL)

  终止液(2M H₂SO₄,10mL/6mL)

  洗涤缓冲液(20×浓缩液)

  样本稀释液

  标准品稀释液

  保存条件:未拆封试剂盒应4℃保存;拆封后,标准品需-20℃保存,其他组分4℃保存‌

  二、实验前准备

  1. 样本处理

  血清‌:室温血液自然凝固10-20分钟,2000-3000转/分离心20分钟,仔细收集上清,如出现沉淀应再次离心‌

  血浆‌:选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后离心(2000-3000转/分,20分钟),收集上清‌

  细胞培养上清‌:离心去除颗粒后分装保存于-80℃,避免反复冻融‌

  组织匀浆‌:按重量体积比1:9加入PBS匀浆,离心后取上清‌

  2. 试剂平衡

  所有试剂及样本需室温(18-25℃)平衡30分钟,避免37℃直接溶解‌

  3. 标准品配制

  复溶标准品后,用稀释液梯度稀释至5,000pg/mL→78pg/mL(7个浓度点),0pg/mL为空白对照‌

  三、实验步骤(双抗体夹心法)

  加样‌:每孔加入100μL标准品或样本,37℃孵育90分钟‌

  洗涤‌:弃液后用PBST洗涤液洗板5次,每次拍干‌

  加检测抗体‌:每孔加100μL生物素化抗体(1:100稀释),37℃孵育60分钟‌

  加酶结合物‌:加入HRP标记链霉亲和素(1:100稀释),37℃避光孵育30分钟‌

  显色‌:加TMB显色液100μL/孔,避光反应15-20分钟(显蓝色)‌

  终止与读数‌:加50μL终止液(变黄色),10分钟内在450nm波长测OD值(参考波长570-630nm)‌

  四、数据分析

  标准曲线绘制‌:以标准品浓度为横坐标,OD值为纵坐标,拟合四参数逻辑曲线(R²>0.99)‌

  样本浓度计算‌:根据样本OD值从曲线反推浓度,超出范围需稀释后重测‌

  质量控制‌:批内CV应<10%,批间CV<12%‌

  五、注意事项

  安全防护‌:

  避免直接接触终止液和底物A、B,一旦接触尽快用水冲洗‌

  实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品‌

  禁止用嘴吸取试剂盒任何成分‌

  操作要点‌:

  试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温‌

  实验中不用的板条应立即放回包装袋密封保存‌

  避免细菌污染、反复冻融或剧烈震荡‌

  一次加样时间控制在10分钟内,样本多时推荐使用多道移液器‌

  干扰因素‌:

  不能检测含NaN3的样品,因NaN3抑制HRP活性‌

  避免溶血或脂血样本影响检测结果‌

  结果判读‌:

  反应孔内颜色越深,阳性程度越强‌

  阴性反应为无色或极浅,可用"+"、"-"号表示‌

  也可测OD值:若大于阴性对照OD值的2.1倍即为阳性‌

  六、技术参数

  灵敏度‌:通常

  注:以上资料仅供参考,具体请咨询技术老师或品牌供应商。

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