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大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒实验使用说明书
点击次数: 37发布时间:2025/7/3 9:27:42
- 上 传 者: 本生(天津)健康科技有限公司
- 上传时间: 2025/7/3 9:27:42
- 文件大小: KB
- 文件类型: doc
- 所属分类: 应用方法
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- 查看次数: 37
资料简介: 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒实验使用说明书 BS-3177 大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒 以下是关于大鼠胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA试剂盒的实验使用说明书,综合了多个来源的操作步骤和注意事项: 一、试剂盒组成 预包被板:96孔或48孔微孔板,已包被抗Casp-9抗体。 标准品:冻干粉形式,需用稀释液复溶,浓度通常为2000 pg/mL,需倍比稀释成梯度浓度。 检测溶液:包括生物素标记抗体(检测溶液A)、酶标二抗(检测溶液B)。 洗涤液:30倍浓缩液,需用蒸馏水稀释。 显色底物(TMB)与终止液:避光保存,显色后需立即终止反应。 二、样本处理 血清/血浆:采集后室温静置10-20分钟,离心(2000-3000 rpm,20分钟)取上清,避免溶血或脂血。 组织匀浆:按重量比加入PBS匀浆,离心后取上清,分装保存于-20℃。 细胞上清:离心去除颗粒,冻存前避免反复冻融。 三、实验步骤 加样: 每孔加入50μL标准品或待测样本(建议复孔),随后加入50μL生物素标记抗体。 37℃孵育1小时,洗涤3次(手工操作或洗板机)。 酶标反应: 加入80μL亲和链酶素-HRP,37℃孵育30分钟,再次洗涤。 显色与终止: 每孔加入底物A/B各50μL,避光孵育10分钟,立即加入50μL终止液。 读数: 使用酶标仪在450 nm波长下测定OD值,通过标准曲线计算浓度。 四、注意事项 试剂保存:未开封试剂盒-20℃保存,开封后酶标板需密封防潮,TMB和终止液需4℃避光。 操作规范:避免泡沫产生,加样时需;洗涤需,防止非特异性结合。 质量控制:建议每次实验设置空白孔和复孔,标准曲线R值应≥0.95。 样本要求:反复冻融不超过3次,组织样本需新鲜处理或液氮速冻。 五、常见问题 显色异常:可能因酶标抗体失效或洗涤不充分,需检查试剂有效期和操作步骤。 背景过高:封闭不或样本中干扰物质过多,可优化封闭液浓度或稀释样本。 注:以上资料仅供参考,不作为实验依据,具体操作请以实际试剂盒说明书为准或咨询品牌商。 天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。
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