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山羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒实验使用说明书
点击次数: 44发布时间:2025/6/18 9:19:12
- 上 传 者: 本生(天津)健康科技有限公司
- 上传时间: 2025/6/18 9:19:12
- 文件大小: KB
- 文件类型: doc
- 所属分类: 应用方法
- 下载次数: 0次
- 查看次数: 44
资料简介: 以下是山羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒的实验使用说明综合指南: BS-6400 山羊白介素1β(IL-1β)ELISA试剂盒 天津本生 一、实验原理 采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附试验(ELISA)。包被微孔中的捕获抗体与样本中的IL-1β结合后,依次加入HRP标记的检测抗体,经显色反应(TMB底物)后,通过450nm波长测定OD值,浓度与颜色深浅呈正相关。 二、试剂盒组成 微孔酶标板:预包被抗体的96孔板(可拆卸) 标准品:冻干粉(通常含6-8个浓度梯度,如10,000-156 pg/mL),需用稀释液复溶 检测抗体:HRP标记的检测溶液A/B,需按1:100稀释 洗涤缓冲液:30倍浓缩液,使用前需蒸馏水稀释 显色底物:TMB(A/B液分装,避光保存) 终止液:2N H₂SO₄溶液 三、样本处理 血清/血浆: 采集后3000×g离心10分钟(血清)或30分钟(血浆,需抗凝剂处理) 避免溶血或脂血,分装保存于-20℃,避免反复冻融 细胞上清/组织匀浆: 离心去除颗粒(3000×g,10分钟),取上清检测 四、操作步骤 试剂平衡:所有组分室温平衡15-30分钟,浓缩洗涤液需溶解结晶(可水浴加温) 加样: 空白孔:不加样品 标准孔:50μL系列浓度标准品 样本孔:先加40μL稀释液,再加10μL样本(最终稀释5倍) 温育:37℃孵育30分钟,封板膜覆盖 洗涤:弃液体,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,重复5次,拍干 加酶标抗体:每孔50μL HRP标记抗体(空白孔除外) 显色:避光加入TMB A/B液各50μL,37℃显色10分钟(蓝色→黄色) 终止与检测:每孔加50μL终止液,立即用酶标仪测450nm OD值 五、注意事项 质量控制:每次实验需做标准曲线及复孔,批内/批间CV应<12% 干扰因素:避免细菌污染(内源性HRP导致假阳性)、溶血或反复冻融 保存条件:未使用的板条需密封防潮,试剂2-8℃保存,禁止冷冻 六、结果计算 以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制曲线,样本浓度通过曲线方程计算后乘以稀释倍数。若样本OD值超出标准曲线范围,需进一步稀释后重测。 注:以上资料仅供参考,如需更详细的参数(如灵敏度、检测范围),请参考具体说明或是咨询供应品牌商。 天津本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标。本生!您信任的合作伙伴。我们愿与您真诚合作,共创美好的未来。IL-1β 试剂盒
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