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资料下载

大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒实验使用说明书

点击次数: 41发布时间:2025/6/12 8:48:54

  • 上 传 者: 本生(天津)健康科技有限公司
  • 上传时间: 2025/6/12 8:48:54
  • 文件大小: 17KB
  • 文件类型: doc
  • 所属分类: 应用方法
  • 下载次数: 0次
  • 查看次数: 41

资料简介:

  大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒实验使用说明书

  以下是关于大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒的实验使用说明综合整理:

  BS-2953  大鼠氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA试剂盒

  一、检测原理

  采用双抗体夹心ELISA法:包被抗大鼠OxLDL抗体的微孔板中依次加入样本和标准品,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物,TMB显色后颜色深浅与OxLDL浓度成正比。

  二、试剂盒组成

  主要组分‌

  预包被酶标板(96孔或48孔)

  标准品(冻干粉或液体,含不同浓度梯度)

  酶标抗体工作液(HRP标记)

  显色液(TMB A/B液)

  终止液(硫酸溶液)

  浓缩洗涤液(20×或30×)

  保存条件‌

  未开封试剂盒需2-8℃保存,部分组分(如标准品)需-20℃冻存;开封后酶标板应密封防潮。

  三、样本处理

  样本类型‌:血清、血浆(EDTA/肝素抗凝)、组织匀浆或细胞上清液。

  处理方法‌:

  血清/血浆:3000转/分离心10-20分钟去除颗粒物。

  组织匀浆:生理盐水匀浆后离心取上清。

  稀释要求:部分试剂盒需用配套稀释液按1:1或1:2预稀释。

  四、实验步骤

  标准品配制‌:冻干标准品需用稀释液复溶,梯度稀释为5-7个浓度(如5ng/ml至75ng/ml)。

  加样与孵育‌:

  每孔加入50μl标准品或样本,37℃孵育1小时。

  洗涤3次后加入酶标抗体,再次孵育30分钟。

  显色与终止‌:

  加入TMB显色液避光反应10分钟,后加终止液变黄色。

  检测‌:450nm波长测定OD值,空白孔调零。

  五、结果计算

  以标准品浓度为横坐标、OD值为纵坐标绘制标准曲线,样本浓度通过曲线方程计算后乘以稀释倍数。

  注意:高浓度样本可能需二次稀释以保证线性范围。

  六、注意事项

  避免反复冻融样本,解冻后需混匀。

  洗涤需彻底,防止非特异性结合。

  显色时间需严格控制,避免过度反应。

  不同批次试剂盒组分不可混用。

  七、局限性

  浓度样本(超过标准曲线范围)需稀释后重测。

  注:以上资料仅供参考,仅限科研使用,不可用于临床诊断。

  如需具体操作细节,建议参考对应试剂盒说明书(如48孔/96孔配置可能步骤略有差异)。

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