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大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒实验使用说明书
点击次数: 38发布时间:2025/3/25 8:48:53
- 上 传 者: 本生(天津)健康科技有限公司
- 上传时间: 2025/3/25 8:48:53
- 文件大小: KB
- 文件类型: doc
- 所属分类: 应用方法
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资料简介: 本生一直视质量控制为企业的生命,追求企业竞争力的不断提升。公司在经营中始终秉承:遵纪守法,严于律己,宽仁以待,敢于承担的企业精神作为标准,以过硬的质量和优良的服务来维护和拓展市场,较大限度的满足客户的需求。与客户的共赢,是我们的发展目标,本生,您信任的合作伙伴!本生试剂盒 大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)ELISA试剂盒的实验使用说明书如下: 1. 实验目的 本试剂盒用于测定大鼠血清、血浆及相关液体样本中巨噬细胞移动抑制因子(MIF)的含量。 2. 实验原理 采用双抗体夹心法测定标本中大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)水平。用纯化的大鼠巨噬细胞移动抑制因子(MIF)抗体包被微孔板,制成固相抗体,依次加入标本、标准品及HRP标记的检测抗体,形成抗体-抗原-酶标抗体复合物。经过洗涤后加底物TMB显色,TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅与样品中的巨噬细胞移动抑制因子(MIF)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度(OD值),通过标准曲线计算样品浓度。 3. 试剂盒组成 封板膜:2片 说明书:1份 密封袋:1个 标准品:2700ng/L,0.5ml×1瓶 酶标包被板:1×48或1×96 样品稀释液:3ml×1瓶或6ml×1瓶 显色剂A液:3ml×1瓶或6ml×1瓶 显色剂B液:3ml×1瓶或6ml×1瓶 终止液:3ml×1瓶或6ml×1瓶 浓缩洗涤液:(20ml×20倍)×1瓶或(20ml×30倍)×1瓶。 4. 样本处理及要求 血清:室温血液自然凝固10-20分钟,离心20分钟左右(2000-3000转/分),收集上清。 血浆:使用EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂,混合10-20分钟后离心,收集上清。 尿液:无菌管收集,离心后取上清。 细胞培养上清:检测分泌性成分时,直接收集上清;检测细胞内成分时,需反复冻融细胞悬液后离心。 组织标本:切割后称重,加入PBS匀浆,离心后取上清。 5. 实验步骤 将标准品、标本依次加入包被微孔板中,温育并洗涤。 加入HRP标记的检测抗体,温育并洗涤。 加入底物TMB显色,反应终止后测定吸光度(OD值)。 根据标准曲线计算样品浓度。 6. 注意事项 试剂盒需在-20℃保存,开封后酶标板需密封保存。 标本采集后应尽快检测,避免反复冻融。 实验操作需在相同环境条件下进行,以减少误差。 7. 结果计算 以标准物的浓度为横坐标,OD值为纵坐标绘制标准曲线,根据样品的OD值计算浓度,再乘以稀释倍数。 以上为实验使用说明书的详细内容,供参考。
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