摘要制药生产所用乙醇必须具备高纯度，且符合药典标准。本应用简报介绍了使用Agilent Cary 3500 多功能紫外-可见分光光度计搭配可变长光程支架，按照美国、欧洲和日本药典中的乙醇专论，对两种乙醇样品进行纯度验证。在所检测的两个乙醇样品中，96% 未变性乙醇样品符合要求，而 100% 未变性乙醇样品的杂质吸光度不满足可接受标准。本应用简报还重点介绍了如何使用 Agilent Cary UV Workstation 软件创建简单、高效的常规质量检测流程。
前言紫外-可见 (UV-Vis) 光谱法是一种快速、灵敏且无损的检测方法，广泛应用于制药行业的质量控制 (QC)。该方法通常需要使用标准的 10 mm 光程比色皿来测量材料的吸光度，QC 实验室可依据检测结果，对目标分析物进行定量或定性分析。在紫外-可见光谱检测中，分光光度计的光度响应遵循朗伯-比尔定律，即样品吸光度与样品光程之间呈线性关系。光程是入射光在样品中穿过的距离。将比色皿光程从 10 mm 增加到50 mm，可以提高样品的吸光度，有助于对峰强度较低的组分实现更准确的定量。反之，如果样品浓度较高，超出系统的线性动态检测范围，则可以使用光程较短的比色皿[1]。在制药行业中，乙醇被广泛应用于药品生产环节，常用作消毒剂、溶剂以及防腐剂。由于乙醇具有两亲性结构，可以溶解亲水性物质和亲脂性物质，因此可作为介质来溶解各类药物制剂的关键成分。乙醇的双重特性还能够破坏微生物细胞膜、使蛋白质变性，以此抑制微生物生长，该作用机制对于药品消毒与防腐至关重要[2]。
因此，制药生产所用乙醇必须符合药典标准，以保障药品的安全性、有效性与质量。美国药典 (USP)[3]、欧洲药典 (EP)[4] 以及日本药典 (JP)[5] 均规定，采用紫外吸收光谱法在指定波长下检测乙醇中的杂质（表 1）。该检测要求：样品吸收光谱曲线应呈平稳下降趋势，无明显吸收峰与肩峰；若出现吸收峰或肩峰，则可作为样品中存在杂质的定性指标。由于杂质的吸光度较低，USP、EP 和 JP 要求使用 50 mm 比色皿来提高灵敏度和检测能力。
实验部分样品前处理空白：量取 17 mL Milli-Q 水 (Millipore, USA) 转移到安捷伦50 mm 光程矩形石英比色皿（部件号 6610016100）中，制得空白。样品：将两种市售乙醇样品（Chem-Supply，部件号 EL043-20L-P，100% 未变性，）各取 17 mL分别转移到单独的 50 mm 光程石英矩形比色皿（部件号6610016100）中，制得待测样品。为了减少蒸发，所有比色皿均加盖密封。仪器：准备好样品后，使用 Cary 3500 多功能紫外-可见分光光度计和可变长光程比色皿支架（设置为 50 mm）测量其吸光度。测试所用仪器参数列于表 2。
结果与讨论使用 Cary UV Workstation 软件中的自定义计算器，评估乙醇样品在美国、欧洲和日本药典指定波长下的吸光度值，这些药典均规定了可接受的杂质吸光度限值。使用批次扫描功能，采集乙醇样品在 235–340 nm 波长范围内的紫外-可见光谱，并观察吸光度曲线的形态。使用 End-of-sequence analysis（序列后分析）功能自动识别指定波长范围内的最大吸光度，并确定乙醇样品是否符合可接受标准（图 2）。
使用水（空白）测量基线后，Cary UV Workstation 软件生成了两个乙醇样品的连续光谱，并根据图 2 中设定的End-of-sequence analysis 参数生成了吸光度表。
图 2. 使用 Agilent Cary UV Workstation 软件内置的 End-of-sequence analysis（序列后分析）功能进行乙醇评估。该计算器支持使用样品元数据创建自定义公式，这些公式可以保存在方法中，以提高效率并尽可能减少出错
如图 3 所示，100% 未变性乙醇（蓝色曲线）满足三项吸光度标准中的两项，仅在 240 nm 处超过了 0.4 的阈值。但该样品的光谱曲线整体平滑下降，无明显凸起或肩峰，表明样品仅存在痕量杂质，不存在污染或大量常规杂质。96% 未变性乙醇（红色曲线）满足所有三项吸光度标准，其光谱曲线整体呈平稳下降趋势，但在 260–290 nm 区间存在一处凸起。该凸起表明样品含有杂质，但其含量处于药用标准允许范围内。由于96% 未变性乙醇样品符合美国、欧洲和日本药典规定的所有三项吸光度标准，因此可用于制药应用，而 100% 变性乙醇样品则不满足药用要求。
生成报告在制药行业，报告必须准确且可追溯，以确保重现性与合规性。Cary UV Workstation 软件通过集成的 Agilent OpenLab 软件包，可满足上述需求。该软件包具备管理控制功能（包括审计追踪），能够保障数据安全采集与存储，符合 FDA 21CFR Part 11 和欧盟附录 11 的要求[6]。检测完成后，软件可自动生成扫描报告（PDF 和/或 CSV 格式），汇总仪器参数、样品信息和计算参数等重要信息，且内容格式可按照用户自定义需求调整（图 4）。然后可以将这些关键参数作为专属检测方法保存在 Cary UV Workstation 软件中，后续乙醇纯度质量检测可直接调用，从而简化流程，无需再每次分析都手动设置序列参数。
值得信赖的系统，更高的数据可靠性对于需要使用长光程比色皿的分析，Cary 3500 多功能模块配备了独特的可变光程支架，适用于矩形和圆柱形比色皿[1]。该支架包含内置卡槽，用户无需使用任何工具即可快速、可重复地切换 20、40、50 和 100 mm 四档光程，省去耗时的校准程序（图 5）。氘灯或钨灯等传统紫外-可见光源必须每年更换，更换流程耗时且成本较高。Agilent Cary 3500 多功能紫外-可见分光光度计配备脉冲氙灯，无需预热，同时节省了更换成本。该光源享有 10 年质保。此外，在使用紫外-可见分光光度计开展任何分析之前，制药实验室必须验证其仪器是否符合运行要求。全球各国药典均明确规定了应如何测试仪器的操作范围。Cary UV Workstation软件可自动执行这些测试，使实验室能够轻松验证其仪器是否符合多种药典（USP、EP、JP）的要求[7]。
结论Agilent Cary 3500 多功能紫外-可见分光光度计搭配可变光程比色皿支架，在依据全球药典标准检测乙醇杂质时，展现出的检测性能。这充分证明该系统适用于药品级质量控制。该系统配备 Agilent Cary UV Workstation 软件，且脉冲氙灯享有 10 年更换质保，操作界面简洁易用，硬件符合 USP、EP、JP 全球药典要求，能够长期稳定运行、维护成本低。优化的工作流程可实现准确的常规光度质量检查，以确保产品符合医药级标准。
