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基于GC-MS/MS的人标准血清中代谢物的分析

点击次数:1199 发布时间:2026/2/5 16:20:03

单四极杆型GC-MS具有的色谱分离能力,测定稳定,因此,广泛用于进行生物体内代谢物性解析的代谢组学解析。但是,生物样品含有较多的代谢物与多种基质,使用单四极杆GC-MS有时难以实施分离。而三重四极杆型GC-MS/MS的MRM在四极杆Q1和四极杆Q3进行2次MS分离,因此,较使用一个四极杆进行MS分离的扫描模式测定,可以除去由干扰成分造成的峰重叠影响,获得高灵敏度且准确的定量结果。 本应用方案利用GC/MS代谢成分数据库Ver.2中的扫描及MRM方法测定人标准血清中的代谢物,并比较了测定结果。


分析条件 :做前处理时,首先向50ul的人标准血清中添加内标2-Isopropylmalic acid,然后使用甲醇/ 水/ 溶液(2.5:1:1)提取代谢物,进行甲肟和三甲基硅基衍生化[1]。对于前处理后的样品按照GC/MS代谢成分数据库Ver.2的方法,以扫描及MRM模式分别各测定6次。Table 1表示分析条件。

1.png

分析结果 :Fig. 1表示基于扫描及MRM模式的血清中代谢物的质色图。这里表示的4个成分由于在扫描模式时受干扰成分影响,造成灵敏度不足,因此,或是没有检出或是重复分析精度在14%以上。而使用MRM模式,去除了干扰成分的影响,可以进行高灵敏度测定,获得了重复分析精度在6.5%以下的良好结果(Table 2)。




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