前言：方法开发和验证用于证明所有新仪器在现有仪器的操作范围和可接受标准内，能够提供相同的结果。将方法从一台仪器转移至另一台仪器时，验证要求取决于 GMP 指南，来确保结果的一致性和重现性。本研究展示了在使用紫外-可见 ChemStation 软件的 Cary 8454 紫外-可见分光光度计与使用 Cary WinUV 软件的 Cary 60 紫外-可见分光光度计之间的方法转移。同时通过对比证明了两种分光光度计系统结果的准确性和重现性。方法的任何其他验证要求均需要满足法规指南和可接受标准。
实验部分设备： – Cary 8454 紫外-可见分光光度计 – 紫外-可见 ChemStation 软件 – Cary 60 紫外-可见分光光度计 – Cary WinUV 软件试剂 – 空白溶液： 0.00 mg/L 高氯酸空白 – 标准溶液： 40 mg/L、80 mg/L 和 120 mg/L 重铬酸钾 – 样品溶液： 约 75 mg/L 重铬酸钾第 1 部分：确定分析波长使用 40 mg/L 的重铬酸钾样品确定合适的波长，并使用 Cary 8454 和 Cary 60 紫外-可见分光光度计在该波长下生成校准曲线。仪器参数：Cary 8454 – ChemStation 软件： 标准模式，光谱/峰任务 – 波长显示： 200–800 nm – 积分时间： 0.5 秒 – 峰/峰谷查找： 查找并标注最多两个峰仪器参数：Cary 60 – WinUV 软件： “扫描”应用程序 – 波长显示： 200–800 nm – 扫描速度： 高级设置：数据间隔 3 nm – 基线： 所选校正 – 峰信息： 峰阈值 0.010，X 标注（图 1）
方法开启 Cary 8454 紫外-可见分光光度计，将灯预热一小时。在预热过程中，打开紫外-可见 ChemStation 软件，选择“标准模式”进行分析并输入参数。预热后，使用高氯酸空白进行空白读数。使用 40 mg/L 高氯酸溶液采集单个光谱，从而确定分析波长。 Cary 60 紫外-可见分光光度计不需要预热。打开 Cary WinUV 软件，选择“扫描”应用程序并输入参数。使用高氯酸空白进行基线采集，然后采集 40 mg/L 重铬酸钾溶液的扫描结果。结果在 Cary 8454 紫外-可见分光光度计和 Cary 60 分光光度计上采集的重铬酸钾谱图具有高度重现性，且在 257 nm 和 350 nm 处鉴定出了相同的峰（图 2a 和 2b）。
结论 Cary 8454 紫外-可见分光光度计和 Cary 60 系统均分析快速且简单易用。如本研究所示，两种系统均有可轻松进行方法开发的软件，能够实现常规紫外-可见方法的快速设置。从 Cary 8454 紫外-可见分光光度计到 Cary 60 紫外-可见分光光度计的两种方法的转移结果证明，可实现重现性峰采集以及准确的标准品和样品测定。本研究分析结果表明，Cary 60 紫外-可见分光光度计（也支持可选的 21 CFR Part 11 软件工具）的性能，可确保法规监管实验室在使用 Cary 60 执行之前为 8453 或 8454 仪器开发的方法时充满信心。
