当前位置: 阿仪网 > 生物试剂/抗体/细胞 > 生物制剂 > PCR检测试剂盒 > 上海雅吉生物科技有限公司 > 产品展示 > PCR检测产品 > 探针法PCR试剂盒 > 石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒15152
石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒15152
企业档案
会员类型:标准版
已获得阿仪网信誉 等级评定
(0 -40)基础信誉积累,可浏览访问
(41-90)良好信誉积累,可接洽商谈
(91+ )优质信誉积累,可持续信赖
阿仪网标准版会员:8年
最后认证时间:无需年检
注册号:**** 【已认证】
法人代表:谭春** 【已认证】
参观次数:2676310
详细内容
石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒,它具有下列特点:
1.即开即用,用户只需要提供样品核酸模板。
2.引物和探针经过优化,分析灵敏性高。
3.提供阳性对照,便于区分假阴性样品。
4.特异性高,引物是根据高度保守区设计,不会跟其他病毒的RNA发生交叉反应。
5.既可用于定性检测,又可用于定量检测。用于定量检测时线性范围至少为5个数量级。
6.本产品足够50次20µL体系的探针法荧光定量RT-PCR反应。
本产品只能用于科研。
探针法的如下:
一、稀释标准曲线样品(以10E1-10E6拷贝/µL这6个10倍稀释度为例)。由于标准品浓度非常高,因此下列稀释操作一定要在独立的区域进行,千万不能污染样品或本试剂盒的其他成分。为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原,本产品不提供活体样品做阳性对照,只提供无传染性的DNA片段作为阳性对照。
1.标记6个离心管,分别为6,5,4,3,2,1。
2.用带芯枪头分别加入45µL荧光RT-PCR专用模板稀释液,用带芯枪头,下同。
3.在6号管中加入5µL 1×10E7拷贝/µL的阳性对照(试剂盒提供),充分震荡1分钟,得1×10E6拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。
4.换枪头,在5号管中加入5µL 1×10E6拷贝/µL的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E5拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。
5.换枪头,在4号管中加入5µL 1×10E5拷贝/µL的阳性对照(上步稀释所得),充分震荡1分钟,得1×10E4拷贝/µL的标准曲线样品。放冰上待用。
6.重复上面的操作直到得到6个稀释度的标准曲线样品。放冰上待用。
二、样品RNA的制备
7.如果有N个样品,设置N+2个提取,多出的是PC(样品制备阳性对照)和NC(样品制备阴性对照)。可以取阳性对照的1000倍稀释液10µL再加上一定量的水,使总体积与待提取样品的规定体积一致,以此作为PC。另外用水作为NC。
8.用自选方法纯化样品的RNA,本试剂盒跟市场上大多数病毒RNA提取试剂盒兼容。也可以选购本公司的柱式病毒RNAout或免提取核酸释放剂。
三、Probe qRT-PCR反应(20µL体系,在样品制备室进行)
9.如果做定量分析并且只做1次重复,则标记N+9个RT-PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于RT-PCR阴性对照(用水做模板),6个用于标准曲线。如果做定性分析并且只做1次重复,则标记N+4个RT-PCR管,其中N+2个用于上步得到的N+2个样品,1个用于RT-PCR阴性对照(用水做模板),1个用于RT-PCR阳性对照(用第4号管的阳性对照稀释液做模板)。下面只以定量分析为例描述操作步骤。在标记管中按下表加入各成分(本表只列出一次重复。样品管和阴性对照设置完毕后才设置阳性对照,并且阳性对照样品要等所有管子盖上盖子储存好后加):(详见随货说明书或向客服咨询)
数据处理
如果把本试剂盒用于定量检测,则以阳性对照浓度的log值为横轴,以Ct值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的Ct值从标准曲线上推算出样品RNA浓度的log值,再推算出其浓度。
如果把本试剂盒用于定性检测,只判断阳性或阴性,则阴性对照Ct必须大于或等于40。阳性对照必须有荧光对数增长,有典型扩增曲线,Ct值应该小于或等于36。对待测样品,如果其Ct大于或等于40则为阴性,如果小于或等于36则为阳性。如果在36-40之间,则重复一次。重复实验的Ct值如果大于或等于40则为阴性,如果小于40,则为阳性。

我公司一管式植物DNAOUT产品及特点:
本产品是一管式超快植物种子和叶片基因组DNA 提取试剂,得到的产物可以直接用于PCR。整个过程简单快速,尤其适合于大规模的转基因植物筛选时样品的制备。
1.快速,整个过程只需要15分钟左右,不需要液氮对植物组织进行冰冻、机械处理、纯化或者DNA的沉淀。运输及保存
2. 一管式,在一个试管内完成所有操作,不容易交叉污染。常温运输及保存,有效期一年。
3. 裂解液可以直接用于PCR,剩余样品可以在4℃保存一月以上。
4. 便于高通量和自动化,适合于海关和企业进行大规模的GMO PCR 筛选。
5. 适用于大多数植物叶片和种子。
使用及效果:将压碎的一小片重量约在100mg左右的植物种子(约1/4 黄豆大小)或直径约为0.5-0.7 cm(或面积相当的其他形状)的植物叶片直接加到新鲜配制的0.1 mL溶液A 中,95℃保温10-15 分钟,加入0.1 mL 溶液B,混匀,直接取上清液(相当于PCR 体积的1/10)作为模板进行PCR。剩余样品可以放4℃保存。
四、结果分析
1. 如果制作标准曲线,则以阳性对照浓度的log值为横轴,以Ct 值为纵轴,绘制标准曲线。再以待测样品的Ct 值从标准曲线上推算出样品DNA 浓度的log 值,推算出其浓度。
2. 如果未制作标准曲线,按照如下标准判定结果:阳性对照(1×10E5 拷贝/µL)结果:Ct 值<30,有明显指数增长,呈典型的 S 型曲线。阴性对照结果:Ct 值>40 或无 Ct 值,无明显指数增长期和平台期。样本检测结果:Ct 值<38,有明显指数增长,表明样本中检测出该病毒,结果为阳性;Ct 值>40 或无 Ct 值,表明样本中未检测出该病毒,结果为阴性;Ct 值在 38-40 范围,应对样本进行复检,如重复实验结果 Ct 值仍在 38-40 范围,有明显指数增长,则判定为阳性,否则为阴性。
运输及保存低温运输:-20℃保存,保存期限为12个月。
自备试剂:样品DNA/RNA,超纯水。
石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒信息由上海雅吉生物科技有限公司为您提供,如您想了解更多关于石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒报价、型号、参数等信息,欢迎来电或留言咨询。
热门标签:石斑鱼源性成分探针法荧光定量PCR试剂盒,雅吉PCR检测试剂盒,雅吉Elisa试剂盒













